بررسی اثر عصاره گیاه زیرفون (Tilia platyphyllos ) بر به یادآوری حافظه در موش های صحرایی نر بالغ مدل آلزایمری شده
الموضوعات :مژگان شبیری 1 , اکرم عیدی 2 , پژمان مرتضوی 3 , شهربانو عریان 4
1 - گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران،ایران
2 - گروه زیست شناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران
3 - ﮔﺮوه ﭘﺎﺗﻮﻟﻮژی، داﻧﺸﮑﺪه ﺗﺨﺼﺼﯽ داﻣﭙﺰﺷﮑﯽ، واﺣﺪ ﻋﻠﻮم و ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت، داﻧﺸﮕﺎه آزاد اﺳﻼﻣﯽ ﺗﻬﺮان، اﯾﺮان.
4 - دانشکده زیست شناسی، دانشگاه خوارزمی، تهران. ایران.
الکلمات المفتاحية: زیرفون , Tilia platyphyllos, حافظه, استرپتوزوتوسین, رت ,
ملخص المقالة :
زمینه و هدف از تحقیق: درختان جنس Tilia در سراسر جهان به دلیل دارا بودن خواص دارویی مورد استفاده قرار می گیرند. گل های زیرفون (Tilia platyphyllos) به عنوان مدر، درمان دردهای شکمی و مسکن مورد استفاده قرار می گیرد. مواد موثره این گیاه شامل فلاونوئیدهای مختلف است. فلاونوئیدها دارای خاصیت آنتی اکسیدانی هستند. در این پژوهش، اثر تیمار عصاره اتانولی گیاه زیرفون بر میزان حافظه به دنبال تزریق درون بطنی استرپتوزوتوسین در موش های صحرایی بالغ نر نژاد ویستار بررسی گردید. روش کار: موش ها به صورت تصادفی به 9 گروه تقسیم شده اند: گروه کنترل سالم، گروه شم (تزریق درون بطنی سالین)، گروه تیمار خوراکی با عصاره گیاه زیرفون (50، 100 و 200 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن، روزانه)، گروه کنترل آلزایمری (استرپتوزوتوسین، 3 میلی گرم بر میلی لیتر، درون بطنی)، گروه دریافت کننده استرپتوزوتوسین و تیمار شده با عصاره گیاه زیرفون. تزریق استرپتوزوتوسین در حیوانات به صورت دو طرفه و در روزهای اول و سوم انجام شد. آزمون رفتاری حافظه توسط روش احترازی غیر فعال و 28 روز پس از اولین دوز استرپتوزوتوسین انجام شد. میزان پارامترهای تاخیر زمانی در ورود (Step through latency, STL) و مدت زمان قرارگیری در اتاقک تاریک (Time in dark compartment, TDC) اندازه گیری گردید. نتایج: نتایج تحقیق حاضر نشان داد که تیمار عصاره گیاه زیرفون بصورت معنی داری موجب افزایش STL و کاهش TDC می شود. بحث: این نتایج نشان می دهد که عصاره گیاه زیرفون اثر حفاظتی بر حافظه و آسیب های نورونی القا شده توسط استرپتوزوتوسین را دارد.
بررسی اثر عصاره گیاه زیرفون (Tilia platyphyllos ) بر به یادآوری حافظه در موش های صحرایی نر بالغ مدل آلزایمری شده
چکیده
زمینه و هدف از تحقیق: درختان جنس Tilia در سراسر جهان به دلیل دارا بودن خواص دارویی مورد استفاده قرار می گیرند. گل های زیرفون (Tilia platyphyllos) به عنوان مدر، درمان دردهای شکمی و مسکن مورد استفاده قرار می گیرد. مواد موثره این گیاه شامل فلاونوئیدهای مختلف است. فلاونوئیدها دارای خاصیت آنتی اکسیدانی هستند. در این پژوهش، اثر تیمار عصاره اتانولی گیاه زیرفون بر میزان حافظه به دنبال تزریق درون بطنی استرپتوزوتوسین در موش های صحرایی بالغ نر نژاد ویستار بررسی گردید.
روش کار: موش ها به صورت تصادفی به 9 گروه تقسیم شده اند: گروه کنترل سالم، گروه شم (تزریق درون بطنی سالین)، گروه تیمار خوراکی با عصاره گیاه زیرفون (50، 100 و 200 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن، روزانه)، گروه کنترل آلزایمری (استرپتوزوتوسین، 3 میلی گرم بر میلی لیتر، درون بطنی)، گروه دریافت کننده استرپتوزوتوسین و تیمار شده با عصاره گیاه زیرفون. تزریق استرپتوزوتوسین در حیوانات به صورت دو طرفه و در روزهای اول و سوم انجام شد. آزمون رفتاری حافظه توسط روش احترازی غیر فعال و 28 روز پس از اولین دوز استرپتوزوتوسین انجام شد. میزان پارامترهای تاخیر زمانی در ورود (Step through latency, STL) و مدت زمان قرارگیری در اتاقک تاریک (Time in dark compartment, TDC) اندازه گیری گردید.
نتایج: نتایج تحقیق حاضر نشان داد که تیمار عصاره گیاه زیرفون بصورت معنی داری موجب افزایش STL و کاهش TDC می شود.
بحث: این نتایج نشان می دهد که عصاره گیاه زیرفون اثر حفاظتی بر حافظه و آسیب های نورونی القا شده توسط استرپتوزوتوسین را دارد.
کلمات کلیدی: زیرفون، حافظه، استرپتوزوتوسین، موش صحرایی
مقدمه
بیماری آلزایمر (Alzheimers Disease, AD)، بیماری تحلیل برنده عقلانی سیستم عصبی مرکزی انسان است. تغییرات متعددی در مغز انسان رخ می دهد که سبب از بین رفتن سلول های مغزی و کوچک شدن مغز می گردد. آلزایمر رایج ترین شکل زوال عقل است. این بیماری با از دست رفتن سیناپس های نورون ها در برخی مناطق مغز، نکروزه شدن سلول های مغز در مناطق مختلف سیستم عصبی، ایجاد ساختارهای پروتئینی کروی شکلی به نام پلاک های پیری در خارج نورون های برخی مناطق مغز و ساختارهای پروتئینی رشته هایی به نام Neurofibrillary tangles در جسم سلولی نورون ها مشخص می شود. علائم مشخصه آن از دست رفتن حافظه، قضاوت و استدلال و ایجاد تغییراتی در حالات و رفتار است. یکی از مشکلات زوال عقل بروز توهم و هذیان است (4). این بیماری علاج ناپذیر، تحلیل برنده و مرگ آور را برای اولین بار روانپزشک و آسیب شناس عصب آلمانی آلوئیز آلزایمر در سال 1906 معرفی کرد و این نام از او گرفته شد (23). دکتر آلویز آلزایمر در 1906 دو علامت از بیماری را توصیف نمود: پلاک ها، رسوبات متراکم ریز فراوان پراکنده شده در سرتاسر مغز که برای سلول های مغزی در سطوح اضافی سمی شده و گرهک ها یا کلافه های مارپیچی شکل (tangles) که توده های غیرطبیعی از فیبرها را در سیتوپلاسم نورون تشکیل می دهند که در ابتدا نورون های بزرگتر را درگیر می نمایند و در فرایندهای حیاتی دخالت کرده و در نهایت سلول های زنده را پر می کنند. زمانی که سلول های مغز تخریب شده و نابود شوند، مغز به طور چشمگیری در برخی نواحی کوچک می گردد. این کوچک شدگی مغز در طول زمان ادامه خواهد داشت .پروتئین تائو وابسته به میکروتوبول که دچار فسفریلاسیون غیر طبیعی شده است، ترکیب اصلی کلافه های نوروفیبریلاری را تشکیل می دهد. هیپرفسفریلاسیون پروتئین تائو علت دیگری از بیماری آلزایمر است. تائو یک پروتئین داخل سلولی است که در تجمع میکروتوبول های داخل آکسونی نقش دارد (9).
نمدار یا زیرفون(Tilia platyphyllos) درختی از تیره پنیرکیان (Malvaceae)، راسته پنیرک سانان (Malvales) است. در حدود 30 گونه درخت در جنس نمدار وجود دارد (3). از مواد موثره این گیاه می توان به فلاونوئیدهای مختلف مانند تیلی روزید، کورستین، ایزوکورستین، هایپروسید و روتین، آمینواسیدهای مختلف شامل آلانین و سیستئین اشاره کرد. فلاونوئیدها ترکیبات فنلی هستند که به طور گسترده در گیاهان توزیع شده اند و دارای خاصیت آنتی اکسیدانی هستند. فلاونوئیدها حتی در مقادیر بسیار ناچیز می توانند بدن را در برابر آسیب اکسیداتیو ناشی از رادیکال های آزاد اکسیژن محافظت کنند. در گل های زیرفون اسانس حاوی فارنسول وجود دارد و نیز شامل تانن و قند می باشد (6). از نظر خواص این گیاه ضد تشنج، آرام کننده، معرق و مدر است. از گیاه زیرفون در طب سنتی استفاده می شود. این گیاه دارای تانن است که به عنوان قابض عمل می کند. از گل های زیرفون در سرماخوردگی، سرفه، تب، عفونت، التهاب، فشار خون بالا، سردرد (به خصوص میگرن)، به عنوان مدر، آنتی اسپاسم و مسکن مورد استفاده است. از برگ ها برای ایجاد تعریق در کاهش تب استفاده می شود. از چوب زیرفون در بیماری های کبد و کیسه صفرا و سلولیت استفاده می گردد (2).
هدف از تحقیق حاضر، بررسی اثر عصاره گیاه زیرفون بر میزان به یادآوری حافظه در موش های آلزایمری شده توسط استرپتوزوتوسین است.
روش کار
گل گیاه زیرفون از عطاری خریداری شده و پس از شستشو و خشک شدن، توسط آسیاب به صورت پودر تبدیل شد. پودر گیاه با اتانول 80% به مدت 4 روز بر روی دستگاه شیکر قرار گرفت تا عصاره گیری صورت گیرد. سپس عصاره توسط دستگاه روتاری خشک گردید.
موشهای صحرایی نر بالغ نژاد ویستار با وزن 230-200 گرم از انستیتو پاستور ایران خریداری شدند. موشها در اتاق حیوانات با حرارت 2±23 درجه سانتی گراد و تحت دوره نوری 12 ساعت تاریکی، 12 ساعت روشنایی و دسترسی آزاد به آب و غذا نگهداری شدند.
برای تزریقات داخل بطنی لازم است کانولای بصورت دو طرفه در بطن های جانبی حیوان تثبیت گردد. ابتدا حیوان با استفاده از کتامین (40 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن) و زایلزین (80 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن) بیهوش گردیده و در دستگاه استریوتاکسی قرار داده شد. پس از مشخص شدن نقاط برگما و لامبدا، بر اساس اطلس پاکسینوس کانولا در مختصات 8/0 میلی متر در سمت خلفی، 6/1 میلی متر در جهت جانبی و 4/3 در جهت شکمی قرار گرفت. تزریق STZ با استفاده از سرنگ هامیلتون انجام شد.
تعداد 66 سر موش صحرایی نر به صورت تصادفی در 11 گروه 6 تایی قرار داده شده اند:
1. کنترل سالم: موشهای این گروه تحت عمل جراحی قرار نگرفتند.
2. شاهد: حیوانات این گروه تحت عمل جراحی و کاشت کانولا قرارگرفتند و 3 میکرولیتر سالین در ناحیه بطنی به صورت دوطرفه تزریق شد.
5-3. تجربی سالم: حیوانات سالم که عصاره گیاه زیرفون را در دوزهای 50،100،200 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن روزانه یکبار از طریق گاواژ دریافت نمودند (16).
6. کنترل آلزایمر: حیوانات این گروه تحت عمل جراحی و کاشت کانولا قرارگرفتند و استرپتوزوتوسین در غلظت 3 میلی گرم بر کیلوگرم با حجم 3 میکرولیتر در هر بطن جانبی به صورت دوطرفه تزریق شد (24).
9-7. تجربی آلزایمری: حیوانات علاوه بر STZ، عصاره گیاه زیرفون را در دوزهای50،100،200 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن روزانه یک بار از طریق گاواژ دریافت نمودند.
مدت تیمار عصاره در حیوانات 28 روز و حجم تیمار 5/0 میلی لیتر بود. پس از انجام تیمار بر روی حیوانات آزمون احترازی غیرفعال با استفاده از دستگاه شاتل باکس انجام گردید.
دستگاه شاتل باکس دارای جعبه آموزش با دو محفظه روشن و تاریک می باشد که توسط دیواره عرضی از یکدیگرجدا شده اند. برای تحریک کف پای حیوان توسط جریان الکتریکی کف محفظه ها دارای میله های فلزی از جنس فولاد ضد زنگ به قطر 5/2 میلیمتر و با فاصله 1 سانتیمتر از یکدیگر می باشد و میله های موجود در محفظه تاریک، یک در میان به قطب مثبت و منفی مربوط می شوند .
اساس آزمون احترازی غیرفعال (Passive Avoidance Learning)برقراری ارتباط بین دو محرک شرطی (نور) و غیرشرطی (شوک الکتریکی) می باشد که شامل جلسات زیر است:
جلسه عادت :(Habitation Session) ابتدا به منظور عادت دادن، حیوان در بخش روشن دستگاه قرارگرفته و پس از گذشت مدت زمان 10 ثانیه درب گیوتینی به آرامی باز می گردد. به محض ورود حیوان به بخش تاریک، درب گیوتینی بسته و حیوان از بخش تاریک دستگاه خارج می شود. این مرحله پس از گذشت مدت زمان 30 دقیقه مجددا تکرار می گردد. اگر حیوانی پس از گذشت مدت زمان 100 ثانیه در هر یک از جلسات وارد بخش تاریک نگردید، در ادامه آزمایشات مورد استفاده قرار نمی گیرد.
جلسه آموزش (Training Session): پس از گذشت 30 دقیقه، حیوان در بخش روشن دستگاه قرار گرفته و به محض ورود حیوان به بخش تاریک، درب گیوتینی به آرامی بسته و شوک ملایمی به میزان 1میلی آمپر، مدت زمان 1 ثانیه و شدت فرکانس 50 هرتز به حیوان اعمال می شود. پس از گذشت مدت 20 ثانیه، حیوان از بخش تاریک دستگاه خارج می گردد.
جلسه آزمون (Test Session): پس از گذشت 24 ساعت، حیوان در بخش روشن دستگاه بدون ایجاد شوک قرار داده شد. درب گیوتینی از قبل باز بوده و کرده و تاخیر زمانی در ورود (Step through latency, STL) و مدت زمان قرارگیری در اتاقک تاریک (Time in dark compartment, TDC) در مدت 300 ثانیه اندازه گیری گردید.
لازم به ذکر است که تمامی مراحل فوق در محدوده زمانی 8 صبح تا 1 بعدازظهر انجام می شود.
داده ها به صورت میانگین ± خطای معیار از میانگین (Mean ± SEM) بیان شده اند. نتایج با استفاده از نرم افزار SPSS-21 تحلیل شدند. برای بررسی نتایج در گروه های مختلف از آزمون آنالیز واریانس یک طرفه و آزمون تعقیبی Tukey استفاده شد. در تمام موارد اختلاف بین گروه ها با p<0.05معنی دار تلقی شده است.
نتایج
نتایج تحقیق حاضر نشان داد که میزان STL در حیوانات آلزایمری شده نسبت به حیوانات کنترل سالم کاهش معنی داری یافته است. تیمار عصاره گیاه زیرفون در دوزهای 100 و 200 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن افزایش معنی داری در میزان STL در حیوانات آلزایمری داشته است. تیمار عصاره گیاه زیرفون در دوزهای 50، 100 و 200 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن تغییر معنی داری در میزان STL در حیوانات سالم نداشته است. اختلاف معنی داری بین گروه شاهد و کنترل بر میزان STL دیده نشده است (نمودار 1).
نمودار 1- اثر تیمار عصاره گیاه زیرفون با دوزهای 50، 100 و 200 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن بر میزان STL در حیوانات سالم و آلزایمری شده. تعداد موش ها در هر گروه ۶ سر می باشد. نتایج به صورت Mean ± SEM ارائه شده است.
001/0 < ***P اختلاف نسبت به گروه کنترل سالم را نشان می دهد.
001/0 < +++P اختلاف نسبت به گروه کنترل آلزایمری را نشان می دهد.
نتایج تحقیق حاضر نشان داد که میزان TDC در حیوانات آلزایمری شده نسبت به حیوانات کنترل سالم افزایش معنی داری یافته است. تیمار عصاره گیاه زیرفون در دوزهای 100 و 200 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن افزایش معنی داری در میزان TDC در حیوانات آلزایمری داشته است. تیمار عصاره گیاه زیرفون در دوزهای 50، 100 و 200 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن تغییر معنی داری در میزان TDC در حیوانات سالم نداشته است. اختلاف معنی داری بین گروه شاهد و کنترل بر میزان TDC دیده نشده است (نمودار 2).
نمودار 2- اثر تیمار عصاره گیاه زیرفون با دوزهای 50، 100 و 200 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن بر میزان TDC در حیوانات سالم و آلزایمری شده. تعداد موش ها در هر گروه ۶ سر می باشد. نتایج به صورت Mean ± SEM ارائه شده است.
001/0 < ***P اختلاف نسبت به گروه کنترل سالم را نشان می دهد.
001/0 < +++P اختلاف نسبت به گروه کنترل آلزایمری را نشان می دهد.
بحث و نتیجه گیری
نتایج تحقیق حاضر نشان داد که تزریق استرپتوزوتوسین در ناحیه بطنی به صورت دوطرفه موجب کاهش میزان حافظه در آزمون احترازی غیرفعال گردید. تزریق درون مغزي استرپتوزوتوسین باعث ایجاد پروتئین بتا آمیلوئید و تشکیل پلاک های آمیلوئیدی می شود و موجب بروز نقـص در حافظـه و اخـتلالات شـناختی و بیماری آلزایمر می گردد. استرپتوزوتوسین از طریق ایجاد استرس اکسیداتیو موجب تغییر فعالیت میکروگلیاها و اختلال در میلین سازی در نواحی درگیر در روندهای شناختی، یادگیری و حافظه می شود (17). تزریق درون بطنی استرپتوزوتوسین، فعالیت استیل کولین استراز را افزایش داده و منجر به تجزیه استیل کولین می شود (20). استرپتوزوتوسین با القای مقاومت انسولینی در مغز موجب اختلال در پیام رسانی انسولین می شود. به طور مثال در هیپوکامپ سبب کاهش بیان ژن رسپتور انسولینی و آنزیم تجزیه کننده انسولین می شود که سرانجام این وضعیت با افزایش تجمع پلاک بتا آمیلوئید و افزایش فسفریله شدن پروتئین های تائو همراه خواهد بود (19). استرپتوزوتوسین توان کاهش آزادسازی استیل کولین را دارد. این نوروترانسمیتر یکی از نوروترانسمیترهای مهم در شکل گیری حافظه است و کاهش میزان آن در مغز، در شکل گیری بیماری آلزایمر موثر است (18). تزریق درون مغزی استرپتوزوتوسین منجر به افزایش پروتئین تائو و بتا آمیلوئید در مغز شده و افزایش بتا آمیلوئید موجب افزایش فرآیند التهاب و ایجاد رادیکال های آزاد می شود (15). در راستای تحقیق حاضر تزریق استرپتوزوتوسین به داخل بطن های مغزی، در مدل احترازی غیر فعال در موش های آزمایشگاهی کاهش معنی داری در حافظه و یادگیری نشان داده است (1). تزریق استرپتوزوتوسین به داخل بطن های مغز، باعث استرس اکسیداتیو در مغز رت ها می شود و باعث اختلالات شناختی و ناهنجاری های فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی می شود و در نهایت منجر به بیماری آلزایمر می شود (10). در تایید نتایج پژوهش حاضر تزریق استرپتوزوتوسین در رت ها بصورت معنی داری موجب کاهش STL و افزایش TDC می گردد (21،22).
نتایج تحقیق حاضر نشان داد که تیمار عصاره اتانولی زیرفون موجب افزایش میزان حافظه در آزمون احترازی غیرفعال در موشهای آلزایمری گردید. گیاه زیرفون دارای ترکیبات فلاونوئیدی مختلف مانند کامپفرول، کوئرستین، ایزوکوئرستین، هایپروسید، روتین و آمینواسیدهای مختلف شامل آلانین و سیستئین می باشد. فلاونوئیدها ترکیبات فنلی هستند که دارای خاصیت آنتی اکسیدانی هستند و گزارش شده که حتی در مقادیر بسیار ناچیز می توانند بدن را در برابر آسیب اکسیداتیو ناشی از رادیکال های آزاد اکسیژن محافظت کنند. گل هاي زیرفون داراي اسانس حاوی فارنسول، تانن، موسیلاژ و قند می باشد (6). عصاره گیاه زیرفون حاوی ترکیبات فنولی با خواص آنتی اکسیدانی و ضد التهاب است (11). ترکیبات فلاونوئیدی موجود در گیاه زیرفون اثرات مطلوب بر روی حافظه و شناخت دارند و باعث مهار دژنراسیون نورونی در بیماری هایی مانند آلزایمر و پارکینسون می شوند (9).ترکیبات فلاونوئیدی موجود در گیاه زیرفون باعث بهبودی در حافظه می شود و همچنین به عنوان تعدیل کننده برای حافظه و یادگیری است (8). گزارش شده است که گیاه زیرفون به دلیل داشتن خواص آنتی اکسیدانی در ترکیبات فلاونوئیدی خود باعث بهبود بیماری های مرتبط با سیستم عصبی مرکزی شده و در بهبود حافظه نقش دارد (14). گیاهان با ترکیبات فلاونوئیدی باعث بهبود نقص های شناختی و دژنراسیون نورونی می شوند و این ترکیبات هم چنین دارای اثر محافظتی نورونی در نواحی مغز به خصوص در حافظه می شود (13). فلاونوئید موجود در گیاه زیرفون دارای اثرات مطلوبی بر روی یادگیری و حافظه دارند (5).
نتایج تحقیق حاضر نشان می دهد که گیاه زیرفون به علت دارا بودن خواص آنتی اکسیدانی، اثرات درمانی بر بهبود حافظه در مدل موش آلزایمری دارد. احتمالا می توان از این گیاه برای درمان حافظه استفاده نمود.
منابع
1. خلیلی، ح.واعظ مهدوی، م. 1391 . اثر مصرف خوراکی عصاره الکلی گیاه بوزیدان بر کاهش حافظه ناشی از تزریق داخل بطنی استرپتوزوتوسین در موش های سفید آزمایشگاهی نر. نشریه پژوهشی پایه و بالینی. شماره 2. صفحات 47-56.
2. ذبیحی، ک. مختاری، ج. صابرآملی، س. 1389. نمدار (TiliaplatyphyllosScop) درختی صنعتی،تزئینی و دارویی. نشریه گیاهان دارویی. صفحه 1.
3. منفرد، ا. قربانلی، م. میر حسینی شاهکوئی، ع. نیاکان، م. 1388. بررسی خصوصیات کمی،کیفی و وضعیت زادآوری گیاه نمدار(TiliaplatyphyllosScop) در جنگل های گرگان (گرمابدشت و قرن آباد)، نشریه گیاه و زیست بوم. شماره 17. صفحات 2-18.
4. Burns, A., Iliffe, S. (2009). Alzheimer disease. BMJ 338; b158.
5. Vauzour, D. (2013). Effect of flavonoids on learning, memory and neurocognitive performance: relevance and potential implications for Alzheimers disease pathophysiology. J Sci Food Agric 94(6); 1042-56.
6. Herrera-Ruiz, M., Roman-Ramos, R., Zamilpa, A., Tortoriello, J., Jimenez-Ferrer, J.E. (2008). Flavonoids from Tiliaamerican with anxiolytic activity in plus-maze test. J Ethnopharmacol 118(2);312-7.
7. Spencer, J.P.E. (2010). The impact of fruit flavonoids on memory and cognition. Br J Nutr 104(53); 540-7.
8. Spencer, J.P.E., Williams, C.M., Rendeiro, C., Guerreiro, J.D.T. (2012). Flavonoids as modulators of memory and learning: molecular interactions resulting in behavioural effects. Proc Nutr Soc 71(2); 246-62.
9. Kaledaite, R., Bernatoniene, J., Majiene, D., Dvorackova, K., Masteikova, R., Muselik, J., et al. (2011). Investigation of antiradical activity of Salvia officinalis L., Urtica dioica L., and Thymus vulgaris L. extracts as potential candidates for a complex therapeutic preparation. J Med Plants Res 5(25);6090-6.
10. Lester-Coll, N., Ivera, E.J., Soscia, S.J. (2006). Intracerebral streptozotocin model of type3 diabetes: Relevance to sporadic Alzheimers disease. J Alzheimers Dis 9(1);13-33.
11. Mendez, M.F. (2012). Early onset Alzheimers disease: non amnestic subtypes and type2 AD. Arch Med Res 43(8);677-85.
12. Heidari, M.R., Sohrevardi, M., Eskandarizadeh, A., Moghadammanesh, H. (2011). The effects of Tilia platyphyllos Scop. extract on seizure induced by picrotoxin and pentylentetrazole in mice. JPHS 1(1);17-24.
13. Muller, M., Flanagan, E., Vauzour, D. (2018). Impact of flavonoids on cellular and molecular mechanisms underlying age-related cognitive decline and neurodegeneration. Curr Nutr Rep 7;49-57.
14. Cardenas-Rodriguez, N., Gonzalez-Trujano, M.E., Aguirre-Hernandez, E., Ruiz-Garcia, M., Sampieri, A., Coballase-Urrutia, E., et al. (2014). Anticonvulsant and antioxidant effect of Tilia Americana var. mexicana and flavonoids constituents in the pentylenetetrazole-induced seizures. Oxid Med Cell Longev 1; 329172.
15. Roghani, M., Baluchnejad mojarad, T. (2006). Effect of naringenin on intracerebroventricular streptozotocin-induced cognitive deficits in rat: a behavioural analysis. Pharmacol 78;193-97.
16. Sheweita, S.A., Mashaly, S., Newairy, A.A., Abdon, H.M., Eweda, S.M. (2016). Changes in oxidative stress and antioxidant enzyme activities in streptozotocin-induced diabetes mellitus in rats: role of Alhagi maurorum extracts. Oxid Med Cell Longev 3; 1-8.
17. Sokoloff, L. (1977). Relation between physiological function and energy metabolism in the central nervous system. J Neurochem 29(1);13-26.
18. Shingo, A.S., Kanabayashi, T., Kito, S., Murase, T. (2013). Intracerebroventricular administration of an insulin analogue recovers STZ-induced cognitive decline in rats. Behav Brain Res 241;105-11.
19. Salkovic-Petrisic, M., Tribl, F., Schmidt, M., Hoyer, S., Riederer, P. (2006). Alzheimer-like changes in protein kinase B and glycogen synthase kinase-3 in rat frontal cortex and hippocampus after damage to the insulin signaling pathway. J Neurochem 96;1005-15.
20. Salkovic-Petrisic, M., Knezovic, A., Hoyer, S., Riederer, P. (2013). What have we learned from the streptozotocin-induced animal model of sporadic Alzheimers disease, about the therapeutic strategies in Alzheimers research. J Neural Transm 120;233-52.
21. Shoham, S., Bejar, C., Kovalev, E., Weinstock, M. (2003). Intracerebroventricular injection of streptozotocin causes neurotoxicity to myelin that contributes to spatial memory deficits in rats. Exp Neural 184(2);1043-52.
22. Salehi, I., Taher Aslani, Z., Moradkhani, S. (2015). Hydro-alcoholic extract of Commiphora mukul gum resin may improve cognitive impairments in diabetic rats. Avicenna J Med Biochem 2(2);e24906.
23. Todd, S., Barr, S., Roberts, M., Passmore, A.P. (2013). survival in dementia and predictors of mortality: a review. Int J Geriatr Psychiatr 28(11);1109-24.
24. Zhou, S., Yu, G., Chi L., Zhu, J., Zhang, W., Zhang, Y., et al. (2013). Neuroprotective effects of edaravone on cognitive deficit, oxidative stress and tau hyperphosphorylation induced by intracerebroventricular streptozotocin in rats. Neurotox 38;136-45.
The effect of Linden (Tilia platyphyllos) extract on memory retention in alzheimer model adult male rats
Abstract
Introduction: Trees from Tilia species are used around the world for their medicinal properties. In folk medicine, the linden (Tilia platyphyllos) flower is used as a diuretic, stomachic, antispasmodic, and sedative agent. This plant has different flavonoids. Flavonoids have significant antioxidant activity. In the present study, the effect of linden ethanolic extract on memory retention induced by intracerebroventricular (ICV) of streptozotocin (STZ) was investigated in adult male Wistar rats.
Materials and methods: The rats were randomly divided into 9 groups: normal control, Sham-operated control (saline, ICV), linden extract (0.05, 0.1, and 0.2 g/kg intragastrically, daily) alone, Alzheimeric control rats (STZ, 110 mg/ml, 3 l/site, ICV), linden extract (0.05, 0.1, and 0.2 g/kg intragastrically, daily) together with STZ, and treatment was performed accordingly. Animals were injected with STZ bilaterally, on the 1st and 3rd days. Administration of linden extract (0.05, 0.1 and 0.2 g/kg) was started 1 h before the first dose of STZ and continued up to 28 days. The learning and memory behavior was assessed by a passive avoidance test 28 days after the first dose and step through Latency (STL) and time in the dark compartment (TDC) were measured by shuttle box.
Results: Our results showed that administration of linden extract (0.1 and 0.2 g/kg) significantly improved STZ-induced cognitive impairment. Linden extract decreased the levels of TDC, while increased STL levels.
Conclusion: These results indicate that linden extract is effective in providing protection against memory deficit and neuronal damage induced by STZ.
Keywords: Linden; Tilia platyphyllos; Memory; Streptozotocin; Rat
