بررسی خاصیت ضدسرطانی پپتید HL-7 از طریق تغییر در بیان ژن Fas، کاسپاز 8 و کاسپاز ۳
محورهای موضوعی : بیوشیمی
زهرا ستایش مهر
1
(استادیار، گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه زابل، زابل، ایران)
حسین کمال الدینی
2
(استادیار، گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه زابل، زابل، ایران)
محمد حاجی تبار
3
(کارشناسی ارشد، گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه زابل، زابل، ایران)
کلید واژه: پپتید, سرطان, دهانه رحم, Hela, HL-7, آپپتوز, کاسپاز ۳, بیان ژن Fas, کاسپاز 8,
چکیده مقاله :
هدف: سرطان دهانه رحم، عامل مهمی در مرگ و میر زنان در سراسر جهان است. نتایج بهدست آمده تا بهامروز، بیانگر دخالت پپتیدهای فعال زیستی در درمان سرطان است. در این راستا، هدف پژوهش حاضر بررسی خاصیت ضدسرطانی پپتید HL-7 از طریق تغییر در بیان ژن Fas، کاسپاز 8 و کاسپاز ۳ است.مواد و روشها: در این مطالعه، زیستپذیری سلولهای سرطانی دهانه رحم تیمار شده با پپتید HL-7 در دو غلظت 45 و 60 میکرومولار در دو زمان 12 و 24 ساعت، با استفاده از سنجش MTT بررسی شد. همچنین بیان ژنهای Fas، کاسپاز 8 و کاسپاز ۳ در سطح mRNA و پروتئین، بهترتیب، با استفاده از روشهای Real-Time PCR و وسترن بلات اندازهگیری گردید. در نهایت، میزان فعالیت کاسپاز 3 و کاسپاز ۸ از طریق آزمون الایزا بررسی شد.یافتهها: نتایج نشان داد که زیستپذیری سلولهای سرطانی تیمار شده با پپتید HL-7 با روشی وابسته به دوز و زمان، کاهش یافت (p<0.05). با افزایش غلظت پپتید HL-7 از 45 به 60 میکرومولار، بهطور معناداری، بیان ژنهای Fas، کاسپاز 8 و 3 در سطوح mRNA و پروتئین افزایش یافت (p<0.05). نتایج آزمون الایزا نشان داد که فعالیت کاسپاز 8 و کاسپاز ۳، بهطور معناداری در سلولهای سرطانی Hela تیمار شده با پپتید HL-7 نسبت به سلولهای سرطانی بدون تیمار، افزایش نشان داد (p<0.05).نتیجهگیری: بهنظر میرسد پپتید HL-7، از طریق تنظیم بیان ژنهای درگیر در مسیر سیگنالینگ اپپتوز بیرونی، قادر به حذف سلولهای سرطانی دهانه رحم است. در عین حال، مطالعات بیشتری در زمینه اهداف مولکولی جهت تأیید خاصیت ضدسرطانی پپتید HL-7 پیشنهاد میشود.
Objective: Cervical cancer is an important cause of female mortality worldwide. The results obtained so far indicate the involvement of bioactive peptides in cancer treatment. In this regard, the aim of the present study is to investigate the anticancer properties of HL-7 peptide through changes in Fas, caspase 8 and caspase 3 geneexpression.Materials and methods: In this study, the viability of cervical cancer cells treated with HL-7 peptide at two concentrations of 45 and 60 μM at two times of 12 and 24 hours was investigated using MTT assay. Also, the expression of Fas, caspase 8 and caspase 3 genes was measured at mRNA and protein levels, respectively, using Real-Time PCR and Western Blot methods. Finally, the activity level of caspase 3 and caspase 8 was checked through ELISA test.Findings: The results showed that the viability of cancer cells treated with HL-7 peptide decreased in a dose- and time-dependent manner (p<0.05). By increasing the concentration of HL-7 peptide from 45 to 60 μM, significantly, the expression of Fas, caspase 8 and 3 genes increased in mRNA and protein levels (p<0.05). The results of the ELISA test showed that the activity of caspase 8 and caspase 3 significantly increased in Hela cancer cells treated with HL-7 peptide compared to untreated cancer cells (p<0.05).Conclusion: It seems that HL-7 peptide is able to eliminate cervical cancer cells by regulating the expression of genes involved in the extrinsic apoptosis signaling pathway. At the same time, more studies on molecular targets are suggested to confirm the anticancer properties of HL-7 peptide.
_||_