ارزیابی بیان ژن ساکس2 با تکنیک RT-PCRدر بافت سرطانی پستان موش بالبسی(خالص) تیمار شده با فیکوسیانین سیانوباکتریAnabaenasp. ISC 55)
محورهای موضوعی : مجله پلاسما و نشانگرهای زیستیفرناز دباغ مقدم 1 , سمیه حامدی 2 , مهروز دزفولیان 3
1 - دانش آموخته کارشناسی ارشد زیست شناسی سلولی-تکوینی، گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، واحد کرج، دانشگاه آزاد اسلامی، البرز. ایران
2 - گروه علوم پایه، دانشکده دامپزشکی، واحد کرج، دانشگاه آزاد اسلامی، البرز. ایران
3 - استادیار گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم، واحد کرج، دانشگاه آزاد اسلامی، البرز. ایران.
کلید واژه: سرطان پستان, فیکوسیانین, Anabaenasp. ISC55, ژن ساکس2,
چکیده مقاله :
زمینه و هدف: امروزه یکی از روش های مفید در بررسی بیماری شایع سرطان پستان، مطالعات سلولی و مولکولی است. ژن ساکس2 در فعال کردن ﺳﻠﻮﻝ ﻫﺎﻯ ﺑﻨﻴﺎﺩﻯ ﻭ ژﻥ ﻫﺎﻯ ﺷﺮﻭﻉ ﻛﻨﻨﺪﻩ ﺗﻤﺎﻳﺰ نقش مهمی را ایفا می کند، در حالی که افزایش ﺑﻴﺎﻥ این ژن در بافت های سرطانی پستان نیز مشاهده شده است. هدف از این پژوهش بررسی میزان بیان ژن ساکس2 در بافت های سرطانی موشهای تیمار شده با فیکوسیانین سیانوباکتری Anabaenasp. ISC 55است.روش کار: برای انجام این تحقیق، 50 سر موش ماده با نژاد بالب سی(خالص) تهیه و از روش کشت تومور سرطانی در ناحیه ی پستانی، جهت القا سرطان پستان استفاده گردید. از طرفی پس از کشت سویه سیانوباکتری در محیط کشت BG11، استخراج فیکوسیانین با روش های اختصاصی صورت گرفت و سپس با نتایج به دست آمده از اسپکتروفتومتری(UV-VIS)، دوزهای 10 و 150 میکرولیتری جهت تیمار گروه های درمانی در نظر گرفته شد. پس از اتمام دوره 21 روزه تزریق، از بافت ها استخراج RNAو متعاقباً ساخت c DNAصورت گرفت و در حضور پرایمر های اختصاصی و شاهد(ژن بتا اکتین)، روش RT-PCRو الکتروفورز انجام و نتایج با نرم افزارهای SPSS-16و Image jمورد آنالیز قرار گرفتند.یافته هانتایج حاصل از RT-PCRدر بررسی های سلولی و مولکولی، نشان دهنده ی این بود که فیکوسیانین با دوز 150 میکرولیتر تاثیر مهارکنندگی بر میزان بیان ژن ساکس2 در سلول های سرطانی پستاندار دارد.نتیجه گیریبا توجه به نتایج، فیکوسیانین آنابنا دارای خواص ضد توموری، از طریق کاهش بیان ژن ساکس2 در بافت درگیر با سرطان پستان می باشد.
Inroduction & Objective:One of the useful common methods in the study of breast cancer is cellular and molecular studies . Sox-2 play an important role in the differentiation of stem cells and started gene, but the expression of this gene in breast cancer tissue are observed . Therefore, the study of gene expression in cancer tissues of mice treated with phycocyanin from Anabaena sp. ISC55 cyanobacteria, which has anti- tumor and anti oxidant effect is there.Material and Methods:In this laboratory study 50 female Balb/C mice (In bread) prepared and planting methods in the area of breast tumors, was used to induce breast cancer. After from cultivation cyanobacteria in the culture medium BG11, extraction phycocyanin to face proprietary were done and some then with the results from spectrophotometry(UV-VIS), doses of 10 and 150 μl order to treatments groups therapeutic were considered. After from completion periods of 21 days injection, RNA extraction would from tissue and subsequently making cDNA were done and then with the primer by proprietary and witness(Bactin), RT-PCR and electrophoresis was performed, and results were analyzed by softwares SPSS-16 and Image j.Results: Analysis of the results of RT-PCR technique showed that a dose of 150 ml phycocyanin inhibitory effect on Sox-2 expression in breast cancer cells.Conclusion: The findings of the present study indicated that phycocyanin from Anabaena sp.ISC55 cyanobacteria has some antitumor effects and can be used in the treatment of breast cancer.