معرفی آزمایش الایزای مبتنی بر پروتئین MBP-G1 به عنوان روش شناسایی گاومیشهای آلوده به ویروس تب بیدوام گاوی
محورهای موضوعی : بیماریهای دامهای بزرگ
کلید واژه: گاومیش, اشرشیاکلی, آزمایش الایزا, پروتئین نوترکیب MBP-G1, ویروس تب&rlm, بی&rlm, دوام گاوی (BEFV),
چکیده مقاله :
تب بی دوام گاوی (BEF) یک بیماری غیر واگیردار در گاو و گاومیش می باشد که در مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری آسیا، استرالیا و افریقا پراکنده شده است. هدف از مطالعه حاضر، بررسی واکنش پذیری پروتئین همجوش MBP-G1 بیان شده در باکتری اشرشیاکلی در یک آزمایش الایزای غیر مستقیم خانگی بود. به این منظور پس از کلونینگ ژن G1 از گلیکوپروتئین G ویروس تب بی دوام گاوی در ناقل pMalc2x و متعاقباً بیان پروتئین در سویه Rosetta اشرشیاکلی، پروتئین نوترکیب MBP-G1 تولید شده به عنوان آنتی ژن پوشاننده کف پلیت در یک آزمایش الایزا استفاده شد. نتایج آزمایش الایزا نشان داد که این پروتئین نوترکیب توانایی واکنش با سرم موش های ایمن شده با واکسن تجاری تب بی دوام گاوی و شناسایی آنتی بادی های ضد ویروس BEF را داشت. بنابراین می توان پروتئین همجوش MBP-G1 بیان شده در اشرشیاکلی را به عنوان یک نامزد مناسب جهت طراحی کیت الایزا برای شناسایی گاومیش های آلوده به ویروس BEF معرفی نمود.
Bovine ephemeral fever (BEF) is a non contagious disease of cattle and water buffalo, spanning in tropical and subtropical zones such as Asia, Australia, and Africa. The aim of this study was to investigate the reactivity of the fusion MBP-G1 protein expressed in Escherichia coli in an indirect in-house ELISA. In order to, after cloning of the G1 gene of bovine ephemeral fever virus (BEFV) G glycoprotein into pMalc2x vector and subsequently expression in Rosetta strain of Escherichia coli, recombinant MBP-G1 proteinwasused as a coating antigen to develop an ELISA. Results showed that the expressed G1 protein could react with immunized mice serum with commercial BEF vaccine and detect of antibodies against BEFV. Thus, the expressed fusion MBP-G1 protein can be introduced as an ideal candidate to develop an ELISA for detection of BEFV-infected water buffalo.
_||_