بررسی موتاسیون های ژنUL54 مقاومت بر علیه گانسیکلوویر در گیرندگان پیوند کلیه و سلول های بنیادی خونساز مبتلا به عفونت سیتومگالوویروس
محورهای موضوعی : ویروس شناسی
1 - 2- استادیار، مرکز تحقیقات پیوند اعضا، دانشکده علوم پزشکی شیراز،شیراز، ایران
کلید واژه: پیوند کلیه, پیوند سلول‌های بنیادی خونساز, سیتومگالوویروس, مقاومت دارویی,
چکیده مقاله :
سابقه و هدف: مقاومت سیتومگالوویروس به گانسیکلوویر با جهش های خاص در ژن های UL97 و UL54 عاملی در شکست درمان و پیشرفت بیماری در گیرندگان پیوند اعضا، به ویژه گیرندگان پیوند کلیه و سلول های بنیادی خونساز است. این مطالعه با هدف تعیین جهش های منجر به مقاومت در ژن های UL54 و UL97 سیتومگالوویروس انسانی انجام شد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه پس از بررسی نمونه های 25 بیمار گیرنده پیوند کلیه و سلول های بنیادی خونساز در طی سال‌های 1394 تا 1396 با بار ویروسی ≥ 10000 کپی بر میلی لیتر، با استفاده از روش Nested-PCR، شش نمونه برای توالی یابی ژنUL54 به روش سنگر انتخاب شدند. از نرم افزار فینچ (نسخه 1.4.0) جهت تجزیه و تحلیل نتایج توالی یابی استفاده شد. یافته‌ها: پس از بررسی تعیین توالی، هیچ جهش شناخته شده‌ای در 4 بیمار دریافت‌کننده پیوند کلیه مشاهده نشد. از سوی دیگر، جهش serine 882 insertionدر ژن UL54 در 1 بیمار گیرنده پیوند سلول‌های بنیادی خونساز مشاهده شد. همچنین بررسی درخت فیلوژنی ژن UL54نشان داد که جدایه ایرانی از نظر اجدادی به 20 سویه مرجع از جمله سویه مرلین تعلق دارد. نتیجه گیری: با توجه به اینکه درمان با گانسیکلوویر منجر به ظهور جهش مقاومت serine 882 insertion و شکست درمان شده است، شناسایی سویه های سیتومگالوویروس مقاوم به دارو و نظارت بر این بیماران برای تعیین بار ویروسی و ارزیابی پاسخ یا عدم پاسخ آنها به درمان بسیار مهم است.
Background & Objectives: Cytomegalovirus resistance to ganciclovir with specific mutations in the UL97 and UL54 genes is a factor in treatment failure and disease progression in organ transplant recipients, especially Kidney and Hematopoietic Stem Cell Transplant recipients. This study aimed to determine the mutations leading to resistance in the UL54 and UL97 genes of human cytomegalovirus. Materials and Methods: In this study after examining samples from 25 Kidney and Hematopoietic Stem Cell Transplant recipients between 2015 and 2017 with viral load ≥ 10,000 copies/mL, six samples were selected for sequencing of the UL54 gene using the Sanger method using the Nested-PCR method. Finch software (version 1.4.0) was used to analyze the sequencing results. Results: After sequencing, no known mutations were observed in 4 Kidney transplant recipients. On the other hand, a serine 882 insertion mutation in the UL54 gene was observed in 1 Hematopoietic Stem Cell Transplant recipient. Also, the phylogenetic tree of the UL54 gene showed that the Iranian isolate ancestrally belongs to 20 reference strains, including the Merlin strain. Conclusion: Considering that ganciclovir treatment has resulted in the emergence of a serine 882 insertion resistance mutation and treatment failure, it is crucial to identify drug-resistant cytomegalovirus strains and monitor these patients for viral load determination and assessment of their response or lack of response to treatment.