ارزیابی بیماری زایی و پلی مورفیسم ژن omph پاستورلا مولتاسیدا
محورهای موضوعی : میکروب شناسی مولکولی
مریم اولاد
1
,
یحیی تهمتن
2
,
نوشین سهرابی
3
1 - دانش آموخته کارشناسی ارشد ژنتیک، دانشگاه پیام نور، واحد ری تهران، ایران
2 - دانشیار، شعبه شیراز، موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، شیراز، ایران
3 - استادیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران
کلید واژه: پلی مورفیسم, پاستورلا مولتاسیدا, روش PCR-RFLP,
چکیده مقاله :
سابقه و هدف: پاستورلا مولتاسیدا باکتری گرم منفی است که باعث بیماری های تنفسی در حیوانات اهلی و وحشی می شود. این مطالعه با هدف جداسازی و شناسایی باکتری پاستورلا مولتاسیدا و نیز بررسی پلی مورفیسم ژن ompH در این باکتری انجام شد. مواد و روش ها: در این مطالعه مقطعی تعداد 160 نمونه سوآب بینی و حلق از بزهای مبتلا به پاستورلوز در استان فارس جمع آوری گردید. طبقه بندی مولکولی و پلی مورفیسم 26 جدایه با روش RFLP-PCR و به کمک آنزیم های برش دهنده HindIII و EcoRI انجام گرفت. هر نمونه با غلظت نیم مک فارلند به دو سر موش تزریق شد. پس از برش ژن ompH توسط آنزیم های اندونوکلئاز، در نهایت الگوهای ایجاد شده با مدت زمان مرگ موش ها مقایسه گردید. یافته ها: آنزیم های HindIII و EcoRI هر کدام الگوهای متفاوتی ایجاد کردند که در مقایسه با میانگین زمان مرگ موش ها قابل توجه بود. تمامی جدایه های کشنده میانگین زمان مرگ زیر 24 ساعت داشتند. همچنین از مجموع 29 پاستورلا مولتاسیدا جدا شده، 89.6 درصد قادر به مرگ موش ها بودند. نتیجه گیری: با توجه به الگوهای ایجاد شده، مدت زمان مرگ در موش ها نیز متفاوت بود. بر این اساس نمونه های دارای الگوهای پر تکرار موش ها را در زمان کوتاهتری از بین بردند و کشنده تر بودند. الگوهای ناشی از هضم آنزیمی به منظور شناسایی سویه های حاد و بیماری زا و در نتیجه تهیه سویه های واکسینال به کار می رود. بنابراین با توجه به تنوع پذیری این سویه ها تهیه واکسن های چندگانه ضرورت پیدا می کند.
Background & Objectives: Pasteurella multocida is a Gram-negative facultative bacterium, causing respiratory diseases in various domestic and wild animals. The aim of this study was isolation and identification of P. multocida and investigation of ompH gene polymorphism of in goats P. multocida isolates. Material & Methods: In a cross-sectional study a total of 160 swab samples from nose and throat of goats infected with Pasteurellosis in Fars province were collected. The ompH gene polymorphism in 26 isolates was genotyped by PCR-RFLP technique. Restriction digestion was performed using HindIII and EcoRI endonuclease enzymes. Each sample was injected into two mice at a concentration of 0.5 McFarland's standard. After ompH gene digestion by endonuclease enzymes, RFLP patterns were compared with mice mean dead time (MDT). Results: Each HindIII and EcoRI enzymes made different patterns, which were remarkable in comparison with MDT in mice. All lethal isolates had MDT less than 24 hours. Out of 29 P. multocida isolates, 89.6 % were lethal in mice. Conclusion: According to established patterns, MDT in mice was different. Based on the results, the samples with more frequent patterns killed mice in a shorter time and were more lethal. Enzyme digestion patterns can be used to detect virulent and pathogenic strains and to provide vaccine strains. Considering the variability of these strains, the production of multiple vaccines is necessary.
_||_