تاثیرزهر زنبور عسل بر بیان ژن VEGF Aبر سلول‌های سرطان پرومیلوسیتی (HL-60)
محورهای موضوعی : زیست شناسی سلولی تکوینی گیاهی و جانوری ، تکوین و تمایز ، زیست شناسی میکروارگانیسم
کلید واژه: سرطان, زهر زنبور عسل, آنژیوژنز, VEGF-A, رده سلولی HL-60,
چکیده مقاله :
مطالعات مختلف بر اثرات ضد سرطانی زهر زنبور عسل تأکید دارد. آنژیوژنزیاتشکیلرگ‌هایخونیجدیدکه برایتکوینجنینوبسیاری ازوقایعفیزیولوژیکیموردنیازاستدربسیاری ازشرایطپاتولوژیکنظیررشدتومورها نیز ضروری است. یکی از ژن‌های فعال در روند رگ‌زایی VEGF-A می‌باشد. در این پژوهش تاثیر زهر زنبور عسل بر بیان این ژن بررسی گردید. سلول‌های HL-60 در محیط کشت RPMI1640غنی شده با 10% FBS کشت داده شد. پس از 24 ساعت، سلول‌ها توسط زهر زنبور در غلظت‌های 2، 4، 8و10 میکروگرم بر میلی‌لیتر تیمار گردیدند. 48 ساعت پس از تیمار، RNA تام استخراج و cDNA با استفاده از توالی ژن مورد نظر سنتز شد و محصولات سنتزشده توسط Real Time PCR جهت بررسی سطح بیان ژن VEGF-Aمورد ارزیابی قرار گرفت.نتایج بررسی آماری داده‌ها نشان داد که کاهش معنادار (05/0(P< در میزان بیان ژنVEGF-A تیمارشده با غلظت‌های 2، 4، 8 و10میکروگرم بر میلی‌لیتر زهر زنبور عسل نسبت به سلول‌های گروه کنترل دیده می‌شود به‌نحوی‌که بیشترین تغییرات کاهشی بیان ژن مربوط به غلظتµg/ml10 زهر زنبور بود.نتایج بیانگر کاهش بیان ژن VEGF-A، بیومارکر ویژه آنژیوژنز در نمونه‌های تحت تیمار با زهر زنبور عسل در مقایسه با گروه کنترل است.
Research indicates that bee venom has potent anti-inflammatory, anti-tumor and anticancer. Angiogenesis or new blood vessel formation, which is required for embryonic development and many physiological events, plays a crucial role in many pathological conditions such as tumor growth. One of the main genes which is involved in the process of angiogenesis is VEGF-A. In this in vitro study, the effects of Bee venom extract on VEGF-A expression were examined. In this experimental study, HL-60 cells were grown in RPMI 1640 medium supplemented with 10% Fetal Bovine Serum (FBS) and incubated at 37˚C with 5% CO2. After 24 h of cell culture, they were treated by the Bee venom at concentrations of 2, 4, 8 and 10 µg/ml. 48 hours after treatment, total RNA was extracted and cDNA was synthesized using the sequence of target gene. Finally, the synthesized products were analysed by Real Time PCR to determine the expression level of VEGF-A. The results of data analysis showed the inhibitory effect of Bee venom in concentrations of 2, 4, 8 and 10 µg/ml on VEGF-A expression in HL-60 cells in comparison with control group, indicating the highest reduction of gen expression for the highest concentration of Bee venom (10 µg/ml). Results indicated a decrease in the expression of VEGF-A, specific biomarker of angiogenesis, in the treated samples compared to the control group.
[1] Breier G. Vasculogenesis. In: Unsicker K, Kriegistein K. 2006. Cell signaling and growth factors in development.Weinheim: Willey & Wang; 909-17.
[2] Cristofanilli M, Broglio KR, Guarneri V, Jackson S, Fritsche HA, Islam R, et al. 2007.Circulating tumor cells inmetastatic breast cancer biology staging beyond tumor burden. Clin Breast Cancer; 7(6): 471-9.
[3] Eun Huh J, HyeonBaek Y, Ho Lee M, Young D and etal.2010. Bee venom inhibitstumor angiogenesis and metastasis by inhibiting tyrosine phosphorylation ofVEGFR-2 in LLC-tumor-bearing mice; Cancer Letters; 292(1): 98–110.
[4] Hamedani M, MirshafieyA, Vatanpour H, Khorramizadeh MR, et al. 2005. In vitroassessment of Bee Venom effects on Matrix Metelloproteinase Activity andInterferon Production. Iranian Journal of Allergy, Asthma and Immunology;27(4): 1-6.
[5] Hendrix M, Seftor E, Seftor R. 2006.Vasculogenic mimicry: angiogenesis in disguise. New Frontiers inAngiogenesis; 5: 97-109.
[6] Hoeben A, Landuyt B, Highley MS, Wildiers H, Van Oosterom AT, De Bruijn EA. 2004.Vascularendothelialgrowth factor and angiogenesis. Pharmacol Rev; 56(4): 549-80.
[7] Hoshyar R, Bathaie SZ, Sadeghizadeh M. 2013. Crocin triggers the apoptosis through increasing the Bax/Bcl-2 ratioand caspase activation in human gastric adenocarcinoma, AGS, cells. DNA Cell Biol; 32(2): 50-7.
[8] Jang MH, Shin MC, Sabina LS, Han SM, et al. 2003. Bee venom induces apoptosis andinhibits expression of cyclooxygenase-2 mRNA in human lung cancer cell lineCIH1299.Pharmacology Science; 91: 95 –104.
[9] Livak KJ, Schmittgen TD. 2001. Analysis of relative gene expression data using real time quantitative PCR and the2ΔCCT methods. Methods; 25(4): 402-408.
[10]. Mansouri K, mostafaei A, mohammadimotlagh HR. 2010.Angiogenesis and tumor. Behbood Journal; 14(4) 305-315.
[11]Mostafaie A, MohammadiMotlagh H, Mansori K. 2009. Angiogenesis and the models to study angiogenesis. J Yakhteh Med; 11(4): 381-79.
[12]Mousavi M, Baharara J, Zafar- BalanejadS and Shahrokhabadi K.2014. effect of Saffaron extract on VEGF-Aexpression in MCF7. Journal of Ker,anshah University of medical sciences; 17(12):55-58.
[13]Nabiuni M, Pariva K, Divsalar A, Safayinejad Z, Nazari Z. 2012. A review onantineoplastic effects of honey bee venom. Zahedan J Res Med Sci (ZJRMS). 13(9): 1-7.
[14]Oršolić N. 2012. Bee venom in cancer therapy. Cancer Metastasis Rev; 31(2):173-194.20.
[15]Park HJ, Lee SH, Son DJ, Oh KW, et al. 2004.Antiarthritic effect of bee venom: inhibition of Inflammation mediator generation by suppression ofNF-kappaB through interaction with the p50 subunit Arthiritis and Rheumatism; 50: 3504-3515.
[16]Peiren N, Vanrobaeys F, Graf DC, Devreese B, etal. 2005. The protein composition of honey bee venomreconsidered by a proteomic approach. BiochemicalBiophysical; 1752:1-5.
[17]Ratanachoo K, Gascoyne PRC, Ruchirawat M. 2002. Detection of cellular responses to toxicants bydielectrophoresis. . BiochimBiophys Acta;1564 (2): 449–458.
[18]Son DJ, Ha SJ, Song HS, Lim Y, et al .2006. Melittininhibits vascular smooth muscle cell proliferationthrough induction of apoptosis via suppression ofnuclear factor-κB and Akt activation andenhancement of apoptotic protein expression.Pharmacology and Experimental Therapeutics; 317(2): 627-34.
[19]Terra RM, Guimaraes JA, Verli H. 2007. Structural andfunctional behavior of biologically active monomeric melittin. Molecular graphics andmodeling; 25(6): 767-72.
[20]Tugues S, Koch S, Gualandi L, Li X. 2011.Vascular endothelial growth factor and receptor: anti angiogenictherapyin treatment of cancer. Molecular Aspects of Medicine; 32: 88-111.
[21]Wu Y, Hooper AT, Zhong Z, Witte L, Bohlen P, Rafii S, et al. 2006. The vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR-1) supports growth and survival of human breast carcinoma. Int J Cancer; 119(7): 1519-29.
[22]Zelent A, Guidez F, Melnick A, Waxman S, etal. 2001. Translocations of the RARa gene in acutepromyelocytic leukemia. Oncogene; 20:7186 –7203.