مطالعه تجربی فرآوری قرنیه بدون سلول شترمرغ به عنوان زنوگرافت
محورهای موضوعی : پاتوبیولوژی مقایسه ای
مریم فتوره چی
1
(دانش آموخته دکتری حرفه ای، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران،)
حمیدرضا فتاحیان
2
(گروه آموزشی علوم درمانگاهی، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.)
عبدالمحمد کجباف زاده
3
(مرکز تحقیقات ارولوژی اطفال، قسمت مهندسی بافت و طب بازساختی، قطب علمی کودکان ایران (مرکز طبی کودکان)، دانشگاه علوم
پزشکی تهران، تهران، ایران)
کلید واژه: قرنیه بدون سلول, ماتریکس خارج سلولی, زنوگرافت, شترمرغ,
چکیده مقاله :
چکیدهقرنیه سالم مهمترین عامل در مسیر اپتیکی چشم محسوب میشود. کوری قرنیه بهعلل و شدتهای متفاوتی رخ میدهد و در اغلب موارد مناسبترین درمان پیوندآلوگرافت است. محدودیتهای نگهداری و کمبود بافت آلوگرافت، استفاده از بافتزنوگرافت را در کنار بیومتریالهای سنتتیک و قرنیه مصنوعی، به عنوان جایگزینمطرح ساخته است. تحقیق حاضر با توجه به نیاز دسترسی به منابع دهنده بافتی، بااستفاده از قرنیه شترمرغ و بهرهگیری از فناوری بدون سلول کردن بافت، به تهیهماتریکس خارج سلولی از قرنیه میپردازد.ده عدد سر شترمرغ از کشتارگاه تهیه شد. پس از آماده سازی و جداسازی قرنیه، باترکیب دو روش شیمیایی مکانیکی و دترجنت یونی، دیسک آسلولار تهیه گردید.بهمنظور تأیید حذف سلولها و حفظ ساختار قرنیه، مقاطع بافتی با میکروسکوپنوری و الکترونی، مورد مطالعه ریزبینی و فوق ریزبینی قرار گرفتند. ارزیابیشفافیت و ضخامت قرنیه به صورت ماکروسکوپی صورت گرفت.مطالعه ریز بینی نمونههای فرآوری شده نشان دهنده حذف سلولهای قرنیه و حفظیکپارچه غشاء پایه بود. بررسی بافت همبندی در مطالعه فراساختاری حاکی از عدمبهم ریختگی در ساختار کلاژنی به همراه افزایش فاصله بین دستجات کلاژنی بود.دیسک آسلولار با درجاتی از کدورت، پس از غوطه ور سازی در گلیسرول 100درصد شفاف گردیدمطالعه حاضر نشان داد با روش کار اشاره شده، دستیابی به بافت بدون سلول از قرنیهشترمرغ امکان پذیر میباشد و پس از انجام سایر آزمایشها نظیر کشت سلول، ایمنی وبیومکانیک، قابلیت کاربرد در مطالعات بالینی تجربی را خواهد داشت.
Healthy cornea is a major element in optical pathway. Corneal blindness can occur due tovarious causes and different severities, and almost the best effective treatment is cornealallotransplantation. The limitation of allograft propounds the usage of other alternatives such asxenograft besides synthetic biomaterials and keratoprostheses. The aim of the study is toproduce Extra Cellular Matrix (ECM) with decellularization method in ostrichs cornea. TheOstrichs heads were obtained from a local slaughter house. All corneas were excised. ThenECM was prepared by the combination of chemomechanical and ionic detergent methods.Cellular components elimination and stromal structure were assessed by three types ofhistological staining and ultra-structural studies. Corneal transparency and thickness evaluatedin macroscopic observation.Histological staining of the decellularized cornea confirmed the complete removal of cornealcells as well as preserving the integrity of basement membrane. The ultra-structural studiesrevealed that decellularization process preserved the native structure of the stromal corneaalthough the collagen bundle space increased slightly. However, after immersing the acellularcornea in 100% glycerol, their optical properties regained to those native corneas.The authors believe that tissue processing method of ostrich cornea which applied in presentstudy can be used as an alternative tissue after completing other examinations such as cellculture, immunological and biomechanical properties.