تاثير مصرف جيره هاي مكمل شده با سطوح مختلف گوانيدينواستيك اسيد بر صفات لاشه، برخي فراسنجههاي بيوشيميايي خون، فعاليت آنزیمهاي كبدي، جمعيت ميكروبي و ريخت شناسي روده در بلدرچینهاي گوشتي ژاپني
محورهای موضوعی : فصلنامه زیست شناسی جانوریرضا علي پور فيل آبادي 1 , مصطفی فغانی 2 * , فرشید خیری 3
1 - گروه علوم دامی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
2 - گروه علوم دامی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
3 - گروه علوم دامی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
کلید واژه: گوانيدينو استيك اسيد, فراسنجههاي بيوشيمايي خون, آنزیم كبدي, ريخت شناسي روده, بلدرچين ژاپني,
چکیده مقاله :
به منظور بررسي اثر مصرف جيرههاي مكمل شده با سطوح مختلف گوانيدينواستيكاسید بر عملكرد، برخي فراسنجههاي بيوشيميايي خون، جمعيت ميكروبي و ريختشناسي روده در بلدرچینهاي گوشتي ژاپني، تعداد 288 قطعه بلدرچین ژاپنی در سن 1-35 روزگی با 4 تیمار آزمایشی شامل گروه شاهد و مصرف کننده گوانيدينو استيك اسيد با سطوح 5/0 و 1 و 5/1 گرم/کیلوگرم از خوراک استاندارد با 6 تکرار و 12 قطعه بلدرچین تخمگذار در هر تکرار استقاده گرديد. در انتهاي دوره (35 روزگي) پس از كشتار دو قطعه پرنده از هر تكرار، صفات لاشه بلدرچینها، فراسنجههاي خوني نظير كلسترول، تريگليسيريد، وي ال دي ال و اچ دي ال و همچنين فعاليت آنزیمهاي كبدي نظير آلكالين فسفاتاز (ALP)، آلانينترانسآميناز (ALT) و آسپارتات ترانسآميناز (AST) بررسي شد. برای ارزيابي بافت و جمعيت فلور ميكروبي روده باريك، نمونهبرداري صورت گرفت. نتايج نشان داد مصرف جيرههاي مكمل شده با گوانيدينواستيك اسيد سبب بهبود معنيدار صفات لاشه در بلدرچینهاي تحت مطالعه شد (05/0 ≤ p). مكملسازي جيره با گوانيدينو استيك اسيد سبب كاهش معنيدار بر غلظت سرمي فراسنجههاي خوني كلسترول، تري گليسريد و LDL و متعاقبا افزايشHDL شد (05/0 ≤ p). بهبود وضعيت فعاليت آنزیمهاي كبدي تحت تاثير مصرف سطوح گوانيدينواستيكاسيد مشاهده گرديد (05/0 ≤ p). افزايش معنيدار جمعيت ميكروبي مفيد لاكتوباسيلوسها و در مقابل كاهش جمعيت كلوني باكتريهاي بيماريزاي اشرشیاكلي و سالمونلا انتريكا در روده همراه با افزايش سطح ويليها و تراكم تعداد سلولهاي گابلت نشاندهنده اثر مكملسازي سطوح مختلف گوانيدينو استيك اسيد بر بهبود وضعيت سلامت روده در بلدرچینهاي تحت مطالعه بود (05/0 ≤ p). نتايج اين مطالعه ننشانگر سودمندي مصرف سطوح مختلف گوانيدينو استيكاسيد بر صفات لاشه، فراسنجههاي بيوشيميايي خون، آنزیمهاي كبدي، ريختشناسي و جمعيت ميكروبي روده در بلدرچینهاي ژاپني بود.
In order to investigate the effect of different levels of Guanidinoacetic acid supplementation supplemneted diets on carcass traits, some blood bichemical and liver enzyme activiies, morphology, intestinal microbial population in broiler Japanese quails, 288 Japanese quails aged 1-35 days with 4 experimental treatments including the control group and those consuming Guanidinoacetic acid at levels of 0.5 and 1 and 1.5 g/kg of standard feed was used with 6 repetitions and 12 pieces of quail in each repetition. At the end of the period (35 days), after killing two quails from each repetition, the cracar traits, blood bichemicals and the liver enzymes activity indices such as alkaline phosphatase (ALP), alanine transaminase (ALT) and aspartate transaminase (AST) were investigated. Additionally, the morphology and intestinal microbial population were examined. The results showed that the Guanidinoacetic acid supplementation supplemented diets caused a significant increase in the thigh, wing, breast and abdominal fat wieght.the result showd that cholestrol, triglycirdie and LDL serum content has decreased and HDL content has increased significantly (p ≤ 0.05). in current study the significant improvement of the liver enzyemes activity has been assayed (p ≤ 0.05). The significant increase of beneficial microbial flora of Lactobacillus and decrease of the colony population of Escherichia coli and Salmonella enterica in the intestine along with the increase in the surface of the villi and the density of the number of goblet cells indicated the beneficial effects of the Guanidinoacetic acid supplementation used in improving the health status of quails (p ≤ 0.05).In conclusion we could demonestare that the benefits of Guanidinoacetic acid supplementation on carcass traits, some blood biochemical, intestinal morphology and intestinal microbial flora in broiler Japanese quails.
1. Ahmadipour, B., Khajali, F., Sharifi, M.R. 2018. Effect of guanidinoacetic acid supplementation on growth performance and gut morphology in broiler chickens. Poultry Science Journal, 6:19-24.
2. Al-Daraji, H.J., Salih, A.M. 2012. Effect of dietary L-arginine on carcass traits of broilers. Animal Veterinary Science, 2:40-44.
3. AOAC. 2005. Official methods of analysis, Association of official analytical chemists. AOAC Press, Gaithersburg, USA.
4. Darmankohi, H., Tavakoli, P., Mohit, A., Mohammadpour, F. 2017. Effects of dietary supplementation of Guanidino acetic acid and L-arginine on performance, blood metabolites and carcass characteristics of Japanese quails. Animal Production Research, 8.9.2:1-10.
5. Davis, S.L. 2011. Plasma levels of prolactin, growth hormone, and insulin in sheep following the infusion of arginine, leucine and phenylalanine. Endocrinology, 91:549-555.
6. Dilger, R.N., Bryant-Angeloni, K., Payne, R.L., Lemme, A., Parsons, C.M. 2013. Dietary guanidino acetic acid is an efficacious replacement for arginine for young chicks. Poultry Science, 92:171-177.
7. Duncan, D.B. 1995. Multiple range test and F-test. Biometrics, 11:1-42.
8. Ebrahimi, M., Zare, A., Shivazad, M., Ansari Pirsaraei, Z., Tebyanian, M., Adib Moradi, M., nourijelyani, K.2015. The Effects of L-arginine Supplement on Growth, Meat Production, and Fat Deposition in Broiler Chickens. Iranian Journal of Animal Science Research, 5(4):281-290.
9. Fathi., M. 2015. Effects of L-Arginine levels supplementation on some blood parameters, thyroid hormones, mortality and performance of broilers with cold-induced ascites. Research Journal of Livestock Science, 107:195-206.
10. Fernandes, J.I.M., Murakami, A.E., Martins, E.N., Sakamoto, M.I., Garcia, E. R.M. 2009. Effect of arginine on the development of the pectoralis muscle and the diameter and the protein: deoxyribonucleic acid rate of its skeletal myofibers in broilers. Poultry Science, 88:1399-1406.
11. Fouad, A.M., El-Senousey, H.K., Yang, X.J., Yao, H. 2013. Dietary L-arginine supplementation reduces abdominal fat content by modulating lipid metabolism in broiler chickens. Animal, 7:1239-1245.
12. Halle, I., M. Henning and P. Kohler. 2006. Studies of the effects of creatine on performance of laying hens, on growth and carcass quality of broilers. Landbauforschung Volkenrode, 56:11-18.
13. Khalil, S., Saenbungkhor, N., Kesnava, K., Sivapirunthep, P., Sitthigripong, R., Jumanee, S., Chaosap, C. 2021. Effects of guanidinoacetic acid Supplementation on Productive performance, pectoral myopathies, and meat quality of broiler chickens. Animals, 11(11):3180.
14. Khajali, F., Wideman R.F. 2010. Dietary arginine: Metabolic, environmental, immunological andphysiological interrelationships. World’s Poultry Science Journal, 66: 751-766.
15. Lemme, A., Ringel, J., Rostagno, H.S., Redshaw, M.S. 2007. Supplemental guanidino acetic acid improved feed conversion, weight gain, and breast meat yield in male and female broilers.16th European Symposium on Poultry Nutrition, pp:26-30.
16. Lev, R., Spicer, S.S. 1964. Specific staining of sulphate groups with Alcian blue at low pH. Journal of Histochemical and Cytochemistry, 12:309-310.
17. Michiels, J., Maertens, L., Buyse, J., Lemme, A., Rademacher, M., Dierick, N.A. De Smet, S. 2012. Supplementation of guanidinoacetic acid to broiler diets: Effects on performance, carcass characteristics, meat quality, and energy metabolism. Poultry Science, 91:402-412.
18. Mousavi, S.N., Afsar, A., Lotfollahian, H. 2013. Effects of guanidinoacetic acid supplementation to broiler diets with varying energy contents. Poultry Science, 22:47-54.
19. Nasiroleslami, M., Torki, M., Saki, A.A., Abdolmohammadi A.R. 2018. Effects of dietary guanidinoacetic acid and betaine supplementation on performance, blood biochemical parameters and antioxidant status of broilers subjected to cold stress. Journal of Applide Animal Research, 46:1016-1022
20. NRC., National Research Council. 1994. Nutrient requirements of poultry.9th Rev.Ed., Washington, DC. National Academy Press.
21. Ostojic, S.M. 2015. Advanced physiological roles of guanidinoacetic acid. European Journal of Nutrition, 54:1211-1215.
22. Rahimian, Y., Kheiri, F., Faghani, M. 2024. Evaluation the effect of dietary vitamin E, sesamin and thymoquinone bioactive compounds on immunological response, intestinal traits and MUC-2 gene expression in broiler Japanese quails (Coturnix japonica). Animal Biotechnology, 35(1):1-11.
23. Raei, A., Karimi, A., Sadeghi, A. 2019. Performance, antioxidant status, nutrient retention and serum profile responses of laying Japanese quails to increasing addition levels of dietary guanidinoacetic acid. Italian Journal of Animal Science, 19(1):75-85.
24. Ringel, J., Lemme, A., Araujo, L.F. 2008. The effect of supplemental guanidinoacetic acid in Brazilian type broiler diets at summer conditions. Poultry Science, 87:154.
25. SAS Institute. 2001. SAS.STAT user’s guide for personal computer. Release 6.12 SAS Institute, Inc., Cary, N.C., USA.
26. Tossenberger, J., Rademacher, M., Nemeth, K., Halas, V., Lemme, A. 2016. Digestibility and metabolism of dietary guanidinoacetic acid fed to broilers. Poultry Science, 95:2058-2067.
27. Vali N. 2008. The Japanese quail. A Review. International Journal of Poultry Science, 7:925-931.
28. Wang, L., Shi, B., Shan, A., Zhang, Y. 2012. Effects of guanidinoacetic acid on growth performance, meat quality and antioxidation in growing-finishing pigs. Journal of Animal Veterinary Advances, 11:631-636.
29. Wu, L.Y., Fang, Y.J., Guo, X.Y. 2011. Dietary L-arginine supplementation beneficially regulates body fat deposition of meat type ducks. British Poultry Science, 52: 221-226.
30. Wyss, M., Kaddurah-Daouk, R. 2000. Creatine and creatinine metabolism. Physiological Review, 80:1107-1213.
زیستشناسی جانوري، سال هفدهم، شماره دوم، زمستان 1403، صفحات 10-1، علیپور فیلآبادی و همکاران
Effect of Different Levels of Dietary Guanidinoacetic Acid Supplementation on Carcass Traits, Some Blood Bichemical, Liver Enzyme Activiies, Intestinal Microbial Population and Morphology in Broiler Japanese Quails
Reza Alipour Filabadi*, Mostafa Faghani, Farshid Kheiri
Department of Animal Sciences, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran *Corresponding author: rezaalipourfilabadi@gmail.com
Received: 25 September 2024 Accepted: 27 January 2025
DOI:
Abstract
In order to investigate the effect of different levels of Guanidinoacetic acid supplementation supplemneted diets on carcass traits, some blood bichemical and liver enzyme activiies, morphology, intestinal microbial population in broiler Japanese quails, 288 Japanese quails aged 1-35 days with 4 experimental treatments including the control group and those consuming Guanidinoacetic acid at levels of 0.5 and 1 and 1.5 g/kg of standard feed was used with 6 repetitions and 12 pieces of quail in each repetition. At the end of the period (35 days), after killing two quails from each repetition, the cracar traits, blood bichemicals and the liver enzymes activity indices such as alkaline phosphatase (ALP), alanine transaminase (ALT) and aspartate transaminase (AST) were investigated. Additionally, the morphology and intestinal microbial population were examined. The results showed that the Guanidinoacetic acid supplementation supplemented diets caused a significant increase in the thigh, wing, breast and abdominal fat wieght.the result showd that cholestrol, triglycirdie and LDL serum content has decreased and HDL content has increased significantly (p ≤ 0.05). in current study the significant improvement of the liver enzyemes activity has been assayed (p ≤ 0.05). The significant increase of beneficial microbial flora of Lactobacillus and decrease of the colony population of Escherichia coli and Salmonella enterica in the intestine along with the increase in the surface of the villi and the density of the number of goblet cells indicated the beneficial effects of the Guanidinoacetic acid supplementation used in improving the health status of quails (p ≤ 0.05).In conclusion we could demonestare that the benefits of Guanidinoacetic acid supplementation on carcass traits, some blood biochemical, intestinal morphology and intestinal microbial flora in broiler Japanese quails.
Keywords: Guanidinoacetic acid, Carcass trait, Blood bichemical, Liver enzyme, Japanese quails.
تاثير مصرف جيرههاي مكملشده با سطوح مختلف گوانيدينواستيكاسيد بر صفات لاشه، برخي فراسنجههاي بيوشيميايي خون، فعاليت آنزیمهاي كبدي، جمعيت ميكروبي و ريختشناسي روده در بلدرچینهاي گوشتي ژاپني
رضا عليپور فيلآبادي*، مصطفی فغانی، فرشید خیری
گروه علوم دامی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
*مسئول مکاتبات: rezaalipourfilabadi@gmail.com
تاریخ دریافت: 04/07/1403 تاریخ پذیرش: 08/11/1403
DOI:
چكيده
به منظور بررسي اثر مصرف جيرههاي مكمل شده با سطوح مختلف گوانيدينواستيكاسید بر عملكرد، برخي فراسنجههاي بيوشيميايي خون، جمعيت ميكروبي و ريختشناسي روده در بلدرچینهاي گوشتي ژاپني، تعداد 288 قطعه بلدرچین ژاپنی در سن 1-35 روزگی با 4 تیمار آزمایشی شامل گروه شاهد و مصرف کننده گوانيدينو استيك اسيد با سطوح 5/0 و 1 و 5/1 گرم/کیلوگرم از خوراک استاندارد با 6 تکرار و 12 قطعه بلدرچین تخمگذار در هر تکرار استقاده گرديد. در انتهاي دوره (35 روزگي) پس از كشتار دو قطعه پرنده از هر تكرار، صفات لاشه بلدرچینها، فراسنجههاي خوني نظير كلسترول، تريگليسيريد، وي ال دي ال و اچ دي ال و همچنين فعاليت آنزیمهاي كبدي نظير آلكالين فسفاتاز (ALP)، آلانينترانسآميناز (ALT) و آسپارتات ترانسآميناز (AST) بررسي شد. برای ارزيابي بافت و جمعيت فلور ميكروبي روده باريك، نمونهبرداري صورت گرفت. نتايج نشان داد مصرف جيرههاي مكمل شده با گوانيدينواستيك اسيد سبب بهبود معنيدار صفات لاشه در بلدرچینهاي تحت مطالعه شد (05/0 ≤ p). مكملسازي جيره با گوانيدينو استيك اسيد سبب كاهش معنيدار بر غلظت سرمي فراسنجههاي خوني كلسترول، تري گليسريد و LDL و متعاقبا افزايشHDL شد (05/0 ≤ p). بهبود وضعيت فعاليت آنزیمهاي كبدي تحت تاثير مصرف سطوح گوانيدينواستيكاسيد مشاهده گرديد (05/0 ≤ p). افزايش معنيدار جمعيت ميكروبي مفيد لاكتوباسيلوسها و در مقابل كاهش جمعيت كلوني باكتريهاي بيماريزاي اشرشیاكلي و سالمونلا انتريكا در روده همراه با افزايش سطح ويليها و تراكم تعداد سلولهاي گابلت نشاندهنده اثر مكملسازي سطوح مختلف گوانيدينو استيك اسيد بر بهبود وضعيت سلامت روده در بلدرچینهاي تحت مطالعه بود (05/0 ≤ p). نتايج اين مطالعه ننشانگر سودمندي مصرف سطوح مختلف گوانيدينو استيكاسيد بر صفات لاشه، فراسنجههاي بيوشيميايي خون، آنزیمهاي كبدي، ريختشناسي و جمعيت ميكروبي روده در بلدرچینهاي ژاپني بود.
کلمات كليدي: گوانيدينو استيك اسيد، فراسنجههاي بيوشيمايي خون، آنزیم كبدي، ريخت شناسي روده، بلدرچين ژاپني.
مقدمه
امروزه به دليل وجود ویژگیهای غذائی مناسب گوشت بلدرچين، پرورش اين پرنده به صورت صنعتی سودآور به جهت تامين مايحتاج نياز پروتئيني جامعه مورد نظر است (27). گوشت بلدرچین به دليل پايين بودن قیمت در مقایسه با گوشت قرمز و همچنین غني بودن از مواد معدني و آلي از جایگاه خاصی در تغذيه انساني برخوردار است (22). اسید آمینه آرژنین نقش مهمی در رشد بلدرچینهاي گوشتي و تخمگذار دارد، به طوری که کمبود این اسیدآمینه میتواند رشد بلدرچینها و سلامت روده را تحت تاثیر خود قرار بدهد و به عبارت دیگر کمبود آرژنین میتواند باعث بدتر شدن رشد، افزایش ضریب تبدیل خوراک و ورم روده شود (14و 29). كراتين به عنوان يك تركيب مهم به منظور ذخيره سازي انرژي با دريافت گروه فسفات از آدنوزينتريفسفات تبديل به كراتينفسفات ميشود كه در متابوليسم انرژي كوتاهمدت بهويژه در سلولهاي ماهيچهاي به عنوان يك پشتيبان مهم براي ATP عمل ميكند (12). گوانیدینواستیکاسید با نام اختصاری GAA، یک ترکیب آلی با فرمول شیمیایی C4H9N3O2 است (13). اين ماده یک ترکیب واسطه متابولیکی است و از اسید آمینههای گلایسین و آرژنین ساخته میشود، که عمدتا این سنتز در کلیه و پانکراس صورت میگیرد؛ سپس در کبد تبدیل به کراتین میشود (28). روند تشکیل کراتین از گوانیدینو استیکاسید یک روند غیر قابل برگشت است (18). GAA به عنوان تنها پيشساز كراتين در بافتهاي حيواني است كه معمولا از گلايسن و آرژنين در كليه توليد شده و در كبد با واسطه آنزیمي پس از متيله شدن به كراتين تبديل میگردد (4، 6). كراتين فسفات به صورت مستقيم در توليد انرژي نقشي ندارد و با انتقال فسفات پر انرژي خود بهADP و تبديل آن به ATP نوعي انرژي سهل الوصول را براي سلولهاي ماهيچهاي فراهم مينمايد (12). حدود 60 تا 70 درصد نياز روزانه كراتين در بدن بلدرچینها از باز سنتز به دست ميآيد و مابقي نياز بدن از طريق خوراك بايستي تامين گردد و از آنجايي كه كراتين و گوانیدینواستیکاسید در منابع گياهي وجود ندارند، در شرايط تغذيه حيوانات از منابع گياهي اين تركيب توسط سنتز در بدن موجود زنده ايجاد و تامين میگردد كه علاوه بر ايجاد فشار مضاعف به كبد و كليه سبب كاهش رشد و راندمان مواد غذايي در آنها میگردد (30). از اينجهت مكمل گوانیدینواستیک اسید به عنوان جايگزيني براي اسيد آمينه آرژنين و عاملي در حفظ تعادل و هموستاز انرژي بدن بلدرچینها مورد توجه است و به نظر ميرسد اگر از منبع خارجي گوانیدینو استیکاسید در تغذيه حيوانات اهلي استفاده شود امكان ادامه سوخت و ساز و توليد كراتين و كراتين فسفات وجود دارد (21). مصرف سطح آرژنين با ميزان10 درصد بالاتر از توصيه NRC و مصرف سطوح 6/0 و 21/ گرم/كيلوگرم از مكمل گوانیدینو استیکاسید در جيره بلدرچینهاي ژاپني سبب افزايش وزن لاشه، بهبود كيفيت ساختار گوشت و كاهش محتوي سرمي تريگليسيريد و كلسترول خون گرديد (4). احتايجات غذايي جوجهها به آرژنين با افزايش سن بالاتر مي رود و استفاده از مكمل گوانیدینو استیکاسید میتواند نقش مهمي در بهبود عملكرد و صفات لاشه در جوجهها داشته باشد (14). ابراهيمي و همكاران آثار مثبت مصرف مكمل آرژنين بر افزايش وزن روزانه، محتواي ماهيچه لاشه، بازده خوراك، وزن لاشه، وزن و ضخامت ماهيچه سينه و ران و بهبود ريختشناسي روده در جوجههاي گوشتي را نشان دادند (8). فرناندز و همكاران نشان دادند استفاده از سطوح بالاي آرژنين و مكملسازي جيره با گوانیدینواستیکاسید منجر به افزايش خطي وزن بافت ماهيچهاي سينه و فيله در جوجههاي گوشتي شد(10). مصرف مكمل جيرهاي آرژنين و گوانیدینو استیکاسید سبب كاهش سطوح پلاسمايي كلسترول و HDL در جوجههاي گوشتي شد (9). استفاده از مكمل گوانیدینو استیکاسید به منظور تامين آرژنين جيره در سطح 5/0 و 6/0 تاثير معنيداري بر افزايش وزن بدن و كيفيت صفات لاشه در جوجههاي گوشتي نداشت (2). مكملسازي جيره با آرژنين و گوانیدینواستیکاسید سبب اثر بر ترشح انسولين از سلولهاي بتا پانكراس و افزايش ترشح هورمون رشد از غده هيپوفيز میگردد و اثرات آنابوليكي بر ماهيچه اسكلتي دارد. استفاده از مكمل گوانیدینواستیکاسید سبب بهبود خصوصيات لاشه از نظر افزايش بازده گوشت سينه و ران میگردد (5). نتايج مطالعات راعي و همكاران نشان داد مصرف گوانيدينو استيك اسيد در سطوح (6/0، 2/1 و 8/1 گرم/كيلوگرم) نشاندهنده بهبود وضعيت آنزیمهاي كبدي و افزايش سطح آنزیمهاي آنتياكسيداني در جوجههاي آزمايشي بود (23). مصرف مكمل گوانیدینو استیکاسید به دليل تامين انرژي ماهيچهاي منجر به استفاده بهينه از اسيدهاي آمينه نظير ميتونين شده و سبب بهبود رشد و توليد در بلدرچینهاي ژاپني میگردد (17). هدف از پژوهش حاضر، بررسي اثرات اثر مصرف جيرههاي مكمل شده با سطوح مختلف گوانيدينو استيك اسيد بر عملكرد، برخي فراسنجههاي بيوشيميايي خون، ريختشناسي و جمعيت ميكروبي روده در بلدرچینهاي گوشتي ژاپني بود.
مواد و روشها
تعداد 288 قطعه بلدرچین ژاپنی (Coturnix japonica) يك روزه با ميانگين وزني تقريبا يكسان (5/1±13) گرم و در سن (1 لغايت 35 روزگی) استفاده گرديد. بلدرچینها در ابتداي دوره آزمایش به صورت دسته جمعی وزن كشي شده و گروههای با میانگین وزنی یکسان در بین تیمارهای مختلف، تقسیم شدند و استانداردهاي درجه حرارت، رطوبت، نور، تهويه و تغذيه مورد توجه قرار گرفت. چهار تیمار آزمایشی شامل گروه شاهد و گروههای مصرفکننده سطوح مختلف گوانیدینواستیکاسید (5/0، 1 و 5/1 گرم/كيلوگرم) با 6 تکرار و12 قطعه بلدرچین ژاپني در هر تکرار استفاده گرديد. كليه اجزاي جيره بلدرچینهاي تحت مطالعه بر اساس روش تجزیه و تحلیل ترکیبات شیمیایی خوراک مورد آناليز قرار گرفت (2) و جيره بلدرچینهاي آزمايشي بر اساس توصيههاي تغذيه اي مربوط به بلدرچینهای ژاپني گوشتي (20) با استفاده از نرم افزار UFFDA متعادل گرديد(جدول1). جيرههاي آزمايشي، آب تازه و سالم آشاميدني به صورت آزاد و نامحدود در اختيار بلدرچینها قرار داده شد. در انتهاي دوره آزمايش تعداد 2 قطعه بلدرچين از هر جايگاه آزمايشي انتخاب و پس از وزن كشي، ذبح و پركني، امعا و احشا داخل بدن بلدرچینها تخليه گرديد و تفكيك لاشه صورت با ترازوي 01/0 گرفت. به منظور اندازهگيري تعيين كلسترول و تريگليسيريد سرم خون از دستگاه طيفسنج نوري مدل Bichrom Libra با طول موج 546 نانومتر و استفاده از كيتهاي زيست شيمي با روش آنزیمي رنگسنجي استفاده گرديد و غلظت آنها با استفاده از رابطههاي رياضي به صورت میلیگرم/دسیلیتر بيان شد. اندازهگيري HDL وLDL توسط دستگاه طيف سنج نوري با طول موج 600 نانومتر با استفاده از كيتهاي تشخيصي پارس آزمون صورت گرفت. ارزيابي فعالیت سرمی آنزیمهای آلانین آمینوترانسفراز (ALT)، آسپارتاتآمینوترانسفراز (AST) و آلكالينفسفاتاز (ALP) با استفاده از دستگاه آنالایزر خودکار با استفاده از کیتهای تجاری پارس آزمون طبق دستورالعمل سازنده تعیین شد. به منظور ارزیابی فلور میکروبی روده و تخمين جمعيت باکتریهای اشرشیاكلي، لاکتوباسیلوس و سالمونلا، یک گرم از نمونههای گوارشی روده جمعآوریشده با 09/0 درصد NaCl استریل تا ده برابر رقیق شد. به منظور انجام شمارش جمعيت باكتريايي سالمونلا اينتريكا با استفاده از محیط MRS-Agar و روش انكوباسيون در محيط بی هوازی به مدت 48 ساعت در دمای 30 درجه سلسيوس، شمارش باكتريهاي اشرشيا كولي انكوباسيون به مدت 48 ساعت و دماي 37 درجه سلسيوس و برای تعیین جمعيت كلوني باكتريايي لاکتوباسیلوس از محيط كشت MRS1-Agar به مدت 72 ساعت انکوباسیون در دمای 37 درجه سلسيوس استفاده شد. پس از انکوباسیون، باکتریها در ظروف پتریديش شمارش شدند و با محاسبه باکتریها در حجم اولیه و شمارشها به صورتlog10 واحد كلوني/گرم در هر گرم گزارش شد (16). براي ارزيابي ريختشناسي روده باريك، بخشهای مختلف روده از تعداد 2 قطعه بلدرچین ذبح شده از هر تکرار جدا شد و تجزیه و تحلیل بر روی مقاطع بافت هماتوکسیلین و ائوزين رنگآمیزی شده گرديد و ارتفاع پرز، عمق كريپت و سطح پرز اندازهگیری شد. طول و عرض پرزهای عمودی کامل از پنج پرز برای هر بلدرچین محاسبه شد. شمارش تعداد سلولهای جامي از چهار پرز مشابه تعیین شد و تراكم آنها با واحد ميليمتر مربع ذکر شد (16). دادههاي به دست آمده با استفاده از نرمافزار آماري 1/9 SAS با رویه مدل خطي عمومي GLM آنالیز شدند (20). مقايسه بين ميانگينها نيز با استفاده از آزمون چند دامنهاي دانکن (7) در سطح احتمال 5 درصد صورت گرفت. مدل آماری طرح به شرح:
Yijk = µ + αi + eijk بود که در آن Yijk مقدار هر مشاهده. µ: ميانگين جامعه. αi:: اثر مکملسازی جيره با گوانیدینواستیکاسید و eijk: اثر اشتباه در آزمايش، بود.
جدول 1- درصد ترکیبات و محتوی مواد مغذی جیره آزمایشی مورد استفاده در بلدرچینهاي ژاپني
Table 1. Percentage of ingredients and nutrient content of the experimental diet used in Japanese quails
Ration items1 | Percent (%) |
Corn kernels | 52.94 |
Soybean meal | 40.04 |
Vegetable oil | 1.75 |
Fish powder | 3.00 |
Calcium carbonate | 1.09 |
Dicalcium phosphate | 0.39 |
Salt | 0.20 |
L-lysine | 0.01 |
DL-methionine | 0.08 |
Mineral and vitamin supplement2 | 0.50 |
Calculated nutrients |
|
Metabolizable energy (kcal/kg) | 2900 |
Crude protein (%) | 24 |
Calcium (%) | 2.5 |
Available phosphorus (%) | 0.38 |
Sodium (%) | 0.15 |
Methionine + Cysteine (%) | 0.91 |
Lysine (%) | 1.35 |
Threonine (%) | 0.96 |
1- جيره متعادل شده براساس NRC، 1994.** هر کیلوگرم مکمل ويتامنه شامل 11000 واحد بينالمللي ويتامين A، 2300 واحد ويتامين D3، 22 واحد ويتامين E، 2 میلیگرم ويتامين K3، 3 میلیگرم تيامين، 40 میلیگرم ربوفلاوين، 18 میلیگرم پانتوتنيک اسيد، 4 میلیگرم پيروکسيدين،017/0 میلیگرم سيانوکوبالامين، 65 میلیگرم نياسين، 3/0 میلیگرم بيوتين، 075/0 میلیگرم فوليک اسيد و 600 میلیگرم کولين کلرايد بود. 2- هر کيلوگرم مکمل معدني شامل 8 میلیگرم آهن، 100 میلیگرم منيزيوم، 60 میلیگرم روي،8 میلیگرم مس، 5/0 میلیگرم يد و 15/0 میلیگرم سلنيوم بود.
1- Balanced diet based on NRC, 1994.** Each kg of vitamin supplement contained 11,000 IU of vitamin A, 2,300 IU of vitamin D3, 22 IU of vitamin E, 2 mg of vitamin K3, 3 mg of thiamine, 40 mg of riboflavin, 18 mg of pantothenic acid, 4 mg of pyridoxine, 0.017 mg of cyanocobalamin, 65 mg of niacin, 0.3 mg of biotin, 0.075 mg of folic acid and 600 mg of choline chloride. 2- Each kg of mineral supplement contained 8 mg of iron, 100 mg of magnesium, 60 mg of zinc, 8 mg of copper, 0.5 mg of iodine and 0.15 mg of selenium.
نتايج
فراسنجههاي شيميايي سرم خون: جدول 33 نشان میدهد که محتوي سرمي كلسترول، تريگليسيريد و LDL در بلدرچینهاي مصرفكننده سطوح مختلف گوانيدينواستيكاسيد به طور معنيداري كاهش يافت (05/0 ≤ p). همچنين نشانگر افزايش معنيدار میزان HDL تحت تاثير تيمارهاي آزمايشي بود (05/0 ≤ p).
فعاليت آنزیمهاي كبدي: فعاليت آنزیمهاي ALP، ALT و AST به عنوان يك شاخص مهم براي تعيين فعاليت و سلامت كبد، تحتتاثير مصرف گوانيدينو استيكاسيد به طور معنيداري كاهش يافت (جدول 4) (05/0 ≥ p).
جمعيت ميكروبي روده: جدول 5 نشاندهنده افزايش معنیدار جمعيت كلوني باكتري لاكتوباسيلوس تحت عنوان فلور ميكروبي مناسب و در مقابل كاهش معنیدار جمعيت سالمونلا انتریکا و اشرشياكلي كه به عنوان فلور مضر و بيماريزا در محيط روده طيور محسوب میگردند، تحت تاثير مصرف سطوح مختلف گوانيدينواستيكاسيد واقع شد (05/0 ≤ p).
ريختشناسي بافت روده: جدول 6 نشان میدهد ارتفاع پرزها، عمق كريپت و سطح پرزهاي روده نسبت به گروه كنترل تحتتاثير مصرف گوانيدينو استيكاسيد افزايش يافته است. بررسي تعداد و تراكم سلولهاي گابلت نشاندهنده افزايش تراكم سلولهاي گابلت با سطوح جيرههاي مكملشده با گوانيدينواستيكاسيد بود (05/0 ≤ p).
جدول 2- اثر استفاده از تيمارهاي آزمايشي بر صفات لاشه در بلدرچینهای ژاپنی
Table 2. Effect of experimental treatments on carcass traits in Japanese quails
Treatment | Supplementation (g/kg) | Thigh weight (g) | Wing weight (g) | Breast weight (g) | Abdominal fat (g) |
Control | 0 | 32.31d | 7.71d | 37.81c | 1.85a |
Guanidine Acetic Acid
| 0.5 | 33.45c | 7.82c | 39.42b | 1.72b |
1 | 35.52b | 7.92b | 39.96b | 1.64c | |
1.5 | 36.14a | 7.99a | 40.11a | 1.55d | |
SEM | - | 0.014 | 0.002 | 0.016 | 0.029 |
تفاوت میانگینها در هر ستون با حروف غیر مشترک نشاندهنده معنیداری است (05/0p ≤ )،SEM (ميانگين خطاي استاندارد)
Differences between means in each column with different letters indicate significance (p ≤ 0.05), SEM (The Standard Error of the Mean)
جدول 3- اثر استفاده از تيمارهاي آزمايشي بر فراسنجههاي بيوشيميايي سرم خون در بلدرچینهای ژاپنی
Table 3. Effect of experimental treatments on serum biochemical parameters in Japanese quails
Treatment | Supplementation (g/kg) | Triglyceride (mg/dL) | Cholesterol (mg/dL) | HDL (mg/dL) | LDL (mg/dL) |
Control | 0 | 259.32a | 192.16a | 102.16a | 96.76a |
Guanidine Acetic Acid | 0.5 | 256.14b | 184.24b | 104.51b | 94.45b |
1 | 250.26c | 180.35c | 105.36c | 92.69c | |
1.5 | 246.52d | 176.44d | 106.72d | 90.14d | |
SEM | - | 1.20 | 1.15 | 0.451 | 0.652 |
جدول 4- اثر استفاده از تيمارهاي آزمايشي بر فعاليت آنزیمهاي كبدي در بلدرچینهای ژاپنی
Table 4. Effect of experimental treatments on liver enzyme activity in Japanese quails
Treatment | Supplementation (g/kg) | AST (U/L) | ALT (U/L) | ALP (U/L) |
Control | 0 | 36.8a | 29.4a | 95.6a |
Guanidine Acetic Acid | 0.5 | 34.5b | 28.2b | 94.2b |
1 | 33.2c | 26.5c | 92.4c | |
1.5 | 30.7d | 24.1d | 82.1d | |
SEM | - | 0.091 | 0.045 | 0.069 |
جدول 5- اثر استفاده از تيمارهاي آزمايشي بر جمعيت ميكروبي روده در بلدرچینهای ژاپنی
Table 5. Effect of experimental treatments on intestinal microbial population in Japanese quails
Treatment | Supplementation (g/kg) | E. coli (Colony/g) | Salmonella enterica (Colony/g) | Lactobacillus (Colony/g) |
Control | 0 | 5.85a | 5.71a | 5.31d |
Guanidine Acetic Acid | 0.5 | 5.62b | 5.40b | 5.46c |
1 | 5.51b | 5.16c | 5.79b | |
1.5 | 5.45b | 5.02d | 6.08a | |
SEM | - | 0.008 | 0.011 | 0.009 |
جدول 6- اثر استفاده از تيمارهاي آزمايشي بر ريخت شناسي روده در بلدرچینهای ژاپنی
Table 6. Effect of experimental treatments on intestinal morphology in Japanese quails
Treatment | Supplementation (g/kg) | Villus height (µm) | Villus surface (µm) | Crypt depth (µm) | Number of goblet cells |
Control | 0 | 594.9d | 0.594c | 139.0d | 10.8c |
Guanidine Acetic Acid | 0.5 | 601.2c | 0.604b | 143.5c | 11.5b |
1 | 605.3b | 0.604b | 146.5b | 12.1a | |
1.5 | 608.5a | 0.611a | 148.4a | 12.2a | |
SEM | - | 1.54 | 0.002 | 0.045 | 0.014 |
بحث
پژوهشهاي اخير نشان داده كه تركيب گوانيدينو استيكاسيد میتواند به طور موثري جايگزين آرژنين در جيره پرندگان شود و از آنجايي كه اين تركيب داراي ثبات و پايداري بالاي و قيمت پايينتر نسبت به مكملهاي آرژنين و كراتنين دارد به عنوان يك مكمل خوراكي موثر در تغذيه طيور مودر توجه قرار ميگيرد. راعي و همكاران نشان دادند در جوجههاي گوشتي و پرندگان ديگر با رشد سريع سيستم كراتين-كراتين فسفات در مديريت انرژي بسيار حائز اهميت است (11، 14). مكملسازي جيره جوجههاي گوشتي با تركيب گوانيدينواستيكاسيد به دليل سرعت رشد بالا و نياز اين پرندگان به منابع كراتينه جهت رشد سلولهاي ماهيچهاي بسيار مفيد و سودمند است. طی مطالعه احمديپور و همكاران بر اثرات مهم مكمل گوانيدينو استيكاسيد بر سيستم كراتين-كراتينكيناز در بيوانرژيك سلولي اشاره شده است (1). ديلگر و همكاران نشان دادند مكملسازي جيره با گوانيدينو استيك اسيد میتواند با افزايش ذخاير كراتين به عنوان منبع انرژي سلولي و تامين آرژنين براي سنتز پروتئين و تكثير سلولي میتواند سبب افزايش عملكرد و بهبود صفات كمي و كيفي لاشه طيور شود (6). رينگل و همكاران بيان كردند افزودن سطوح مختلف گوانيدينواستيك اسيد به جيره با تاثير بر بهبود و افزايش جريان فاكتور رشد شبه انسولين منجر به توانايي رشد سلولهاي ماهيچهاي و بهبود معنيدار اجزاي لاشه ويژه ران و سينه در جوجههاي گوشتي گرديد (24). همچنين توسنبرگر و همكاران نشان دادند مصرف گوانيدينو استيك اسيد سبب افزايش وزن زنده، كاهش ضريب تبديل غذايي، بهبود راندمان و كيفيت لاشه و افزايش وزن نسبي ماهيچه ران و سينه شد (26). ليمه و همکاران نيز بیان داشتند که استفاده از گوانیدینواستات به ميزان 6/0 و 2/1 گرم/كيلوگرم خوراك جوجههاي گوشتي تأثیر معناداری برروی وزن گوشت سینه داشت که برای نرها و مادهها بهترین وزن گوشت سینه را ایجاد نمود (15). گوانيدينواستيكاسيد پس از مصرف از طریق كليهها جذب و توسط گردش خون به کبد رسيده و در كبد با اس- آدنوزيل متيونين واکنش نشان میدهد تا کراتین تولید کند. كراتنين در گردش خون پخش میشود و یک سیستم اسید فسفریک را با کراتین فسفات تشکیل میدهد (17، 18). هنگامی که عرضه ATP کافی نیست، کراتین فسفات به سرعت یک گروه اسید فسفریک را به ADP منتقل میکند و ATP را بازسازی میکند. هیدرولیز ATP انرژی بیشتری را آزاد میکند که مستقیم ترین منبع انرژی موجود در ارگانیسم است. بنابراین، اضافه کردن گوانيدينواستيك اسيد میتواند موجب افزایش ذخیره انرژی و متابولیسم بدن بلدرچینهاي ژاپني شود (1). ابراهيمي و همكاران نشان دادند مصرف مكملهاي كراتينه سبب تاثير بهتر آرژنين بر هورمونهاي تيروئيدي و كاهش غلظت پلاسمايي كلسترول و تريگليسيريد میگردد (8) همچنين نصيرالاسلامي و همكاران بيان كردند مصرف مكل گوانيدينو استيك اسيد سبب ايجاد تغييرات معنيدار بر غلظت سرمي كلسترول و تريگليسيريد شد (19). مطالعه درمان كوهي و همكاران نشان داد مصرف مصرف سطوح مختلف گوانيدينواستيكاسيد در جيره بلدرچینهاي گوشتي سبب كاهش میزان سرمي كلسترول، تريگليسيريد و LDL و متعاقبا افزايش HDL شد (4). فوآد و همكاران نشان دادند مصرف مكملهاي آرژنين نظير گوانيدينو استيك اسيد در جيره سبب كاهش بيان ژن آنزیم اسيد چرب سنتتاز كبدي و نهايتا منجر به كاهش تريگليسيريد پلاسما ميشود (11). كاهش فعاليت آنزیم اسيد چرب سنتتاز كبدي منجر به كاهش قابليت دسترسي اسيدهاي چرب براي استريفيه شدن به تريگليسيريد ميشود و آنزیم 3 هيدروكسي3 متيل گلوتاريل كوآ ردوكتاز كه يك آنزیم حياتي در بيوسنتز كلسترول میباشد با كاهش بيان ژن اين آنزیم سبب كاهش ميزان تريگليسيريد و كلسترول خون ميشود (1، 14). مطالعات راعي و همكاران نشان داد مصرف گوانيدينو استيك اسيد در سطوح (6/0، 2/1 و 8/1 گرم در كيلوگرم) سبب كاهش ضخامت موكوس، افزايش سطح و افزايش طول ويلي، كاهش عمق كريپت و افزايش نسبت ويلي/كريپت در جوجههاي آزمايشي شد (23). توسنبرگ و همكاران بيان كردند مصرف مكمل گوانيدينو استيك اسيد سبب افزايش ارتفاع و سطح پرزها، عمق كريپت، افزايش تعداد سلولهاي گابلت و بهبود وضعيت فلور ميكروبي روده شد كه احتمالا به دليل تاثير گوانيدينواستيكاسيد بر تغيير مثبت فلور ميكروبي میباشد (26).
نتيجهگيري
يافتهها نشان داد که صفات لاشه به صورت مثبت تحت تاثير پاسخ به مكملسازي با گوانيدينواستيكاسيد قرار گرفتند. همچنين محتوي سرمي فراسنجههاي بيوشيميايي خون نظير كلسترول و تريگليسيريد و LDLتحت تاثير مصرف گوانيدينواستيكاسيد كاهش يافت. مصرف سطوح مختلف گوانيدينواستيكاسيد سبب كاهش معنيدار فعاليت آنزیمهاي كبدي به عنوان شاخص مهم در تعيين وضعيت سلامت فعاليت كبد شد. همچنين نتايج نشان داد مصرف گوانيدينواستيكاسيد در سطوح 05/0، 1 و 5/1 گرم/كيلوگرم جيره بلدرچینهاي ژاپني سبب كاهش جمعيت ميكروبي مضر روده و بهبود صفات ريختشناسي روده باريك بلدرچینهاي ژاپني تحت مطالعه شد.
منابع
2. Al-Daraji, H.J., Salih, A.M. 2012. Effect of dietary L-arginine on carcass traits of broilers. Animal Veterinary Science, 2:40-44.
3. AOAC. 2005. Official methods of analysis, Association of official analytical chemists. AOAC Press, Gaithersburg, USA.
4. Darmankohi, H., Tavakoli, P., Mohit, A., Mohammadpour, F. 2017. Effects of dietary supplementation of Guanidino acetic acid and L-arginine on performance, blood metabolites and carcass characteristics of Japanese quails. Animal Production Research, 8.9.2:1-10.
5. Davis, S.L. 2011. Plasma levels of prolactin, growth hormone, and insulin in sheep following the infusion of arginine, leucine and phenylalanine. Endocrinology, 91:549-555.
6. Dilger, R.N., Bryant-Angeloni, K., Payne, R.L., Lemme, A., Parsons, C.M. 2013. Dietary guanidino acetic acid is an efficacious replacement for arginine for young chicks. Poultry Science, 92:171-177.
7. Duncan, D.B. 1995. Multiple range test and F-test. Biometrics, 11:1-42.
8. Ebrahimi, M., Zare, A., Shivazad, M., Ansari Pirsaraei, Z., Tebyanian, M., Adib Moradi, M., nourijelyani, K.2015. The Effects of L-arginine Supplement on Growth, Meat Production, and Fat Deposition in Broiler Chickens. Iranian Journal of Animal Science Research, 5(4):281-290.
9. Fathi., M. 2015. Effects of L-Arginine levels supplementation on some blood parameters, thyroid hormones, mortality and performance of broilers with cold-induced ascites. Research Journal of Livestock Science, 107:195-206.
10. Fernandes, J.I.M., Murakami, A.E., Martins, E.N., Sakamoto, M.I., Garcia, E. R.M. 2009. Effect of arginine on the development of the pectoralis muscle and the diameter and the protein: deoxyribonucleic acid rate of its skeletal myofibers in broilers. Poultry Science, 88:1399-1406.
11. Fouad, A.M., El-Senousey, H.K., Yang, X.J., Yao, H. 2013. Dietary L-arginine supplementation reduces abdominal fat content by modulating lipid metabolism in broiler chickens. Animal, 7:1239-1245.
12. Halle, I., M. Henning and P. Kohler. 2006. Studies of the effects of creatine on performance of laying hens, on growth and carcass quality of broilers. Landbauforschung Volkenrode, 56:11-18.
13. Khalil, S., Saenbungkhor, N., Kesnava, K., Sivapirunthep, P., Sitthigripong, R., Jumanee, S., Chaosap, C. 2021. Effects of guanidinoacetic acid Supplementation on Productive performance, pectoral myopathies, and meat quality of broiler chickens. Animals, 11(11):3180.
14. Khajali, F., Wideman R.F. 2010. Dietary arginine: Metabolic, environmental, immunological andphysiological interrelationships. World’s Poultry Science Journal, 66: 751-766.
15. Lemme, A., Ringel, J., Rostagno, H.S., Redshaw, M.S. 2007. Supplemental guanidino acetic acid improved feed conversion, weight gain, and breast meat yield in male and female broilers.16th European Symposium on Poultry Nutrition, pp:26-30.
16. Lev, R., Spicer, S.S. 1964. Specific staining of sulphate groups with Alcian blue at low pH. Journal of Histochemical and Cytochemistry, 12:309-310.
17. Michiels, J., Maertens, L., Buyse, J., Lemme, A., Rademacher, M., Dierick, N.A. De Smet, S. 2012. Supplementation of guanidinoacetic acid to broiler diets: Effects on performance, carcass characteristics, meat quality, and energy metabolism. Poultry Science, 91:402-412.
18. Mousavi, S.N., Afsar, A., Lotfollahian, H. 2013. Effects of guanidinoacetic acid supplementation to broiler diets with varying energy contents. Poultry Science, 22:47-54.
19. Nasiroleslami, M., Torki, M., Saki, A.A., Abdolmohammadi A.R. 2018. Effects of dietary guanidinoacetic acid and betaine supplementation on performance, blood biochemical parameters and antioxidant status of broilers subjected to cold stress. Journal of Applide Animal Research, 46:1016-1022
20. NRC., National Research Council. 1994. Nutrient requirements of poultry.9th Rev.Ed., Washington, DC. National Academy Press.
21. Ostojic, S.M. 2015. Advanced physiological roles of guanidinoacetic acid. European Journal of Nutrition, 54:1211-1215.
22. Rahimian, Y., Kheiri, F., Faghani, M. 2024. Evaluation the effect of dietary vitamin E, sesamin and thymoquinone bioactive compounds on immunological response, intestinal traits and MUC-2 gene expression in broiler Japanese quails (Coturnix japonica). Animal Biotechnology, 35(1):1-11.
23. Raei, A., Karimi, A., Sadeghi, A. 2019. Performance, antioxidant status, nutrient retention and serum profile responses of laying Japanese quails to increasing addition levels of dietary guanidinoacetic acid. Italian Journal of Animal Science, 19(1):75-85.
24. Ringel, J., Lemme, A., Araujo, L.F. 2008. The effect of supplemental guanidinoacetic acid in Brazilian type broiler diets at summer conditions. Poultry Science, 87:154.
25. SAS Institute. 2001. SAS.STAT user’s guide for personal computer. Release 6.12 SAS Institute, Inc., Cary, N.C., USA.
26. Tossenberger, J., Rademacher, M., Nemeth, K., Halas, V., Lemme, A. 2016. Digestibility and metabolism of dietary guanidinoacetic acid fed to broilers. Poultry Science, 95:2058-2067.
27. Vali N. 2008. The Japanese quail. A Review. International Journal of Poultry Science, 7:925-931.
28. Wang, L., Shi, B., Shan, A., Zhang, Y. 2012. Effects of guanidinoacetic acid on growth performance, meat quality and antioxidation in growing-finishing pigs. Journal of Animal Veterinary Advances, 11:631-636.
29. Wu, L.Y., Fang, Y.J., Guo, X.Y. 2011. Dietary L-arginine supplementation beneficially regulates body fat deposition of meat type ducks. British Poultry Science, 52: 221-226.
30. Wyss, M., Kaddurah-Daouk, R. 2000. Creatine and creatinine metabolism. Physiological Review, 80:1107-1213.