معتبرسازی روش اندازه گیری مقدار کلیندامایسین در فرمولاسیون لیپوزومی
محورهای موضوعی : بیوفیزیک
مطهره مقدسی پور
1
,
رابعه خوشنویس زاده
2
,
فاطمه نوربخش
3
1 - گروه بیوتکنولوژی میکروبی ، دانشکده علوم زیستی، واحد ورامین-پیشوا، دانشگاه آزاد اسلامی، ورامین-پیشوا، ایران
2 - گروه بیوشیمی- بیوفیزیک، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه آزاد اسلامی ورامین-پیشوا
3 - گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم زیستی، واحد ورامین-پیشوا، دانشگاه آزاد اسلامی، پیشوا، ایران
کلید واژه: معتبرسازی, اسپکتروفتومتری, کلیندامایسین, لیپوزوم,
چکیده مقاله :
کلیندامایسین برای درمان انواع عفونت های باکتریایی تجویز می شود که بعلت وجود مکانیسم های مختلف مقاومتی در باکتری ها در برخی موارد اثر درمانی ندارد. یکی از راه های مقابله با مقاومت باکتری ها بهره گیری از فرمولاسیون لیپوزومی است. در ساخت هر فرمولاسیون لیپوزومی نیاز به اندازه گیری مقدار داروی وارد شده به ساختار لیپوزومی است که از طریق یک روش معتبر انجام می شود. در این تحقیق روشی جهت اندازه گیری مقدار کلیندامایسین در فرمولاسیون لیپوزومی آن بیان شده است. معیارهای معتبرسازی بر طبق پروتکل ICH Q2B شامل میزان خطی بودن، صحت، دقت، انتخابی بودن، حساسیت حد تشخیصی و حساسیت حد تعیین مقدار بدست آمد. در این مطالعه نمونه ها در محلول متانول و سود 1/0 مولار با نسبت حجمی 8 به 1 حل شده و با کمک تکنیک UV اسپکتروفتومتری شدت جذب آن ها در طول موج 201 نانومتر اندازه گیری شد. با این روش امکان رسم نمودار کالیبراسیون کلیندامایسین در دامنه غلظتی 2/0 تا 8/1 میلی گرم بر میلی لیتر با ضریب همبستگی 999/0 فراهم شد. این مطالعه نشان داد که فرمولاسیون لیپوزومی تهیه شده از فسفولیپید (6/2%)، کلسترول (8/0%) و کلیندامایسین (1%) (وزنی بر حجمی) که 50 بار با متانول رقیق شده هیچ جذبی در 201 نانومتر نداشته و می توان غلظت کلیندامایسین را بدون دخالت مولکول های تشکیل دهنده لیپوزوم اندازه گیری کرد. درصد قابلیت تولید مجدد80 و 83 درصد به ترتیب برای 80% و 120% غلظت کلیندامایسین حاصل شد. انحراف معیار استاندارد برای اندازه گیری پارامتر دقت در یک روز و دقت بین روزها کمتر از 4% بوده و حد تشخیصی و حد تعیین مقدار به ترتیب 043/0 و 131/0 میلی گرم بر میلی لیتر بدست امد. این نتایج نشان داد که این روش ساده و در دسترس می تواند برای اندازه گیری مقدار کلیندامایسین در فرمولاسیون لیپوزومی مناسب باشد.
Clindamycin is prescribed to treat the different infections but in some cases, it does not have any medical effect because of different resistance mechanisms in bacteria. A method to counter the resistant bacteria is to use liposomal formulation. Making liposomal formulation needs to measure the content of injected drug into liposome. In this study, a method was proposed to measure the content of clindamycin in liposomal formulation. Criteria of verification based on ICH Q2B protocol included linearity, accuracy, precision, selectivity, sensitivity of diagnosis and determination limits. Initially, each sample was solved in methanol and 0.1M soda with 8:1 and then intensity of attraction for each sample was measured with 201 nm wavelength by UV spectrophotometer. It was possible to draw the calibration curve for clindamycin in range of 0.2 to 8.1 mg/ml with correlation coefficient of 0.999 by this mechanism. This study showed that liposomal formulation obtained by phospholipid (% 2.6), cholesterol (%0.8) and clindamycin (%0.1) and diluted with methanol for 50 times does not have any attraction in 201 nm. Therefore, it is possible to measure the concentration of clindamycin without molecules forming liposome. The capacity of reproducing clindamycin in range of 0.80 and 0.120 is 80% and 83% respectively. The standard deviation for intra- and inter-day precision is lower than 4% and diagnosis and determination limits are 0.43 and 0.131 mg/ml respectively. The result showed that this method can be suitable to measure the content of clindamycin in liposomal formulation.
_||_