بررسی اثر غوطه وری با باکتری های Vibrio harveyi و Vibrio alginolyticus بر مرگ و میر میگوی پاسفید (Litopenaeus vannamei) و بررسی هیستوپاتولوژی هپاتوپانکراس، روده و هموسیت ها در میگوهای آلوده
محورهای موضوعی : پژوهش های بالینی دام های بزرگ
کلید واژه: هیستوپاتولوژی, ویبریو آلجینولیتیکوس, میگوی پاسفید, ویبریو هاروی,
چکیده مقاله :
ویبریوها باکتریهای محیطهای آبی محسوب می شوند که بصورت گسترده ای در آبهای شیرین، مناطق مصبی و محیطهای دریایی پراکنده شده اند. در این تحقیق تاثیر باکتری های V.harveyi و V.alginolyticus بر روی مرگ و میر پست لاروهای 75 روزه میگوی پا سفید (Litopenaeus vannamei) مورد مطالعه قرار گرفت. آزمایشات بیماریزایی تجربی به روش غوطه وری 30 دقیقه ای و با غلظتهای 108 و109 سلول باکتری در میلی لیتر از هر دو باکتری و تحت شرایط نگهداری بدون استرس انجام گرفت. باکتری V.alginolyticus در هیچ یک از غلظت های مورد مطالعه تلفات قابل توجهی را در جمعیت میگوها ایجاد نکرد. باکتری V.harveyi در غلظت 109 سلول در میلی لیتر تلفات قابل توجه 9/61% را در جمعیت میگوهای مورد مطالعه ایجاد کرده است که میزان جداسازی باکتری از میگوهای تلف شده 8/76% بوده است. ضایعات میکروسکوپیک ایجاد شده در میگوهای بیمار آلوده به V.harveyi در بافت هپاتوپانکراس شامل نکروز و جدا شدن سلول های پوششی هپاتوپانکراسی، بهم ریختن ساختمان ستاره ای شکل توبول ها، حضور ریزه بافت در توبول ها و در موارد نادر تجمع ملانین در اطراف سلول های نکروز شده بوده است. در بافت روده میگوهای آلوده به V.harveyi در 28% موارد نکروز موضعی لایه سلول های پوششی مشاهده گردید. در صد جمعیتی هموسیت های دانه دار بزرگ (LGC)و نیمه دانه دار (SGC) در میگوهای آلوده به V.harveyi کاهش معنی داری را نسبت به گروه شاهد نشان می دهد در حالی که در صد جمعیتی هموسیتهای بدون دانه کوچک (HC) نسبت به گروه شاهد افزایش معنی داری را نشان داده است (05/0≥P). نتایج می تواند به تشخیص هیستوپاتولوژیکی بیماری ویبریوزیس میگو کمک بکند.
Vibrio spp are the most important bacterial pathogens of shrimp. Vibrio spp are aquatic bacteria that are widely distributed in fresh water, estuarine and marine environments. In this paper the effects of Vibrio harveyi and Vibrio alginolyticus bacteria on mortality rate of 75-day old Litopenaeus vannamei post larvaes were studied. Pathogenicity experiments were done by 30-minute bath method and with 108 and 109 cell/ml concentrations of the two strains of bacteria under optimal circumstance. No significant mortality was seen in the studied concentrations of V.alginolyticus in shrimp population. In V.harveyi challenge at 109 cell/ml concentration significant mortality (61.9%) of shrimp population was seen and the bacterium was isolated from 76.8% of the cases. Histopathological lesions in diseased shrimps in challenge with V. harveyi were dominantly necrosis and sloughing of hepatopancratic epithelial cells, deterioration of acinar structure of tubules, haemocyte infiltration in sinusoidal spaces of hepatopancreas. Tissue debris in tubules and in rare cases melanin aggregation around the necrotic cells was also seen. Focal necrosis and sloughing of epithelial cells in intestine tissue were seen in 28% of diseased shrimps. Population percentage of large granular haemocytes (LGC) and semi granular haemocytes (SGC) in diseased shrimps were decreased significantly in comparison with the control group and population percentage of hyaline cells were increased significantly (p≤0.05). Results of this surevey can help histopathological recognition of vibriosis disease in shrimp.
1- تمجیدی، ب. اسماعیلی، ف. مزرعاوی، م. جهانشاهی، ع.ا. و کر، م.ن(1375): گزارش نهایی بررسی بیماریهای باکتریایی پوسته و ویبریوزیس در میگوهای پرورشی منطقه آبادان، موسسه تحقیقات شیلات.
2- عباسی، س. جمشیدیان، م. شریف پور، ع. و رجب زاده، ا(1379): بررسی تجربی بیماریزایی ویبریو آلجینولیتیکوس در میگوهای سفید هندی پرورشی به روش تزریق داخل همولنف. مجموعه مقالات اولین همایش بهداشت و بیماریهای آبزیان ایران، 25 الی 27 بهمن 1379، اهواز.
3- کیسمی، م.آ. کاکولکی، ش. شریف پور، ع. و سلطانی، م(1380): بررسی آلودگی زئونوز باکتریهای ویبریو در میگوهای پرورشی منطقه حله استان بوشهر. اولین کنگره سراسری طب و دریا، 8-10 اسفند 1380، دانشگاه علوم پزشکی بوشهر.
4- Ahearn, G.A., Duerr, J.M., Zhuang, Z., Brown, R.J., Aslamkhan, A., Killebrew, D.A., (1999): Ion transport processes of crustacean epithelial cells. Physiol Biochem Zool.72(1):1-18.
5- Bell, T.A. and Lightner, D.V., (1988): A Handbook of Normal Penaeid Shrimp Histology. World Aquaculture Society, Baton Rouge, Louisiana. 114 p.
6- Bhavan, P.S and Geraldine, P., (2000): Histopathology of the hepatopancreas and gills of the prawn Macrobrachium malcolmsonii exposed to endosulfan. Aquatic Toxicology 50, p: 331–339.
7- Diggles, B. K., Moss, G. A., Carson, J. and Anderson, C. D., (2000): Luminous vibriosis in rock lobster Jasus verreauxi (Decapoda: Palinuridae) phyllosoma larvae associated with infection by Vibrio harveyi. DISEASES OF AQUATIC ORGANISMS 43, p:127-137.
8- Esteve, M. and C. Herrera, F., (2000): Hepatopancreatic Alterations in Litopenaeus vannamei (Boone, 1939) (Crustacea: Decapoda: Penaeidae) Experimentally Infected with a Vibrio alginolyticus Strain. Journal of Invertebrate Pathology 76, p:1–5.
9- Guzman, G.A., Juárez, R.V., and Felipe Ascencio, F., (2002): Differences in the Susceptibility of American White Shrimp Larval Substages (Litopenaeus vannamei) to Four Vibrio Species. Journal of Invertebrate Pathology Volume 78, Issue 4, P: 215-219.
10- Guzman, G.A., Labreuche, Y., Ansquer, D., Espiau, B., Levy, P., Ascencio, F and Saulnier, D., (2003): Proteinaceous exotoxins of shrimp-pathogenic isolates of Vibrio penaeicida and Vibrio nigripulchritudo. Ciencias Marinas, p: 77-88.
11- Houwen, B., (2000): Blood Film Preparation and Staining Procedures. Laboratory Hematology 6:1–7, Carden Jennings Publishing Co., Ltd.
12- Karunasagar, I., Pai, R., Malathi, G.R., Karunasagar, I., (1994): Mass mortality of Penaeus monodon larvae due to antibiotic resistant Vibrio harveyi infection. Aquaculture 128, 203–209.
13- Karunasagar, I., Karunasagar, I. and Umesha, R.K., (2002): Microbial Diseases in Shrimp Aquaculture. Department of Fishery Microbiology,University of Agricultural Sciences, College of Fisheries, Mangalore-575 002, India.
14- Le Groumellec, M., Haffner, P., Martin, B., Martin, C., (1995): Comparative study of bacterial infections responsible for mass mortality in penaeid shrimp hatcheries of the Pacific zone. In: Shariff, M., Arthur, . J.R., Subasinghe (Eds.) , Diseases in Asian Aquaculture II. Fish Health Section, Asian Fisheries Society, Manila, pp. 163–173.
15- Le moullac, G., Le groumellec, M., Ansquer, D., Froissard, S., Peva levy and AQUACOP, (1997): Haematological and phenoloxidase activity changes in the shrimp Penaeus stylirostris in relation with the moult cycle: protection against vibriosis. Fish & Shellfish Immunology, Vol 7, p: 227-234.
16- Lightner, D.V., (1988): Vibrio disease of penaeid shrimp. In: Sindermann, C.J., Lightner, D.V. Eds. , Disease Diagnosis and Control in North American Marine Aquaculture Developments in Aquaculture and Fisheries Science vol. 17 Elsevier, Amsterdam, pp. 42–47.
17- Lightner, D.V. (ed.)., (1996): A Handbook of Shrimp Pathology and Diagnostic Procedures for Diseases of Cultured Penaeid Shrimp. World Aquaculture Society, Baton Rouge, LA, USA.
18- Lopez, N., Cuzon, G., Gaxiola, Taboada, G., Valenzuela, M., Pascual,C., Sanchez, A. and Rosas, C., (2003): Physiological, nutritional, and immunological role of dietary β 1-3 glucan and ascorbic acid 2-monophosphate in Litopenaeus vannamei juveniles. Aquaculture 224, 223–243.
19- Martin, G.G., Rubin, N. and Swanson, E., (2004): Vibrio parahaemolyticus and V.harveyi cause detachment of the epithelium from the midgut trunk of the penaeid shrimp Sicyonia ingentis. Dis Aquat Org, Vol. 60: 21–29.
20- Nash. G.L., (1990): Penaeus monodon grow out disease (in malysia), Ed by New, M.B.; Sarsam, H.D. and Singh.T. Technical and economic aspects of shrimp farming . pp.172-182.
21- Robertson, P.A.W.; Calderon, J.; Carrera, L.; Stark, J.R.; Zherdmant, M. and Austin, B., (1998): Experimental Vibrio harveyi infections in Penaeus vannamei larvae. Dis Aquat Org 32, p: 151-155.
22- Ruangsri, J., Wannades, M., Wanlem, S., Songnui, A., Arunrat, S., Tanmark, N., Pecharat, J. and Supamattaya, K., (2004): Pathogenesis and virulence of Vibrio harveyi from southern part of Thailand in black tiger shrimp, Penaeus monodon Fabricius. Songklanakarin J. Sci. Technol., 26(1) p: 43-54.
23- Saulnier, D., Haffner, P., Goarant, C., Levy, P. and Ansquer, D., (2000): Experimental infection models for shrimp vibriosis studies: a review. Aquaculture 191, P: 133–144.
24- Sindermann, C.J. and Lightner, D.V., (1988): Disease diagnosis and control in north American marine aquaculture.Elsevier Science Publishers, second edition, Vol 8, p: 318-323.
25- Vandenberghe, J., Verdonck, L., Robles-Arozarena, R., Rivera, G., Bolland, A., Balladares, M., Gomez-Gil, B., Calderon, J., Sorgeloos, P. And Swings, J., (1999): Vibrios Associated with Litopenaeus vannamei Larvae, Postlarvae, Broodstock, and Hatchery Probionts. APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, p: 2592–2597.
26- Van De Braak , C.B.T., Botterblomi, M.H.A., Liu, W., Taverne, N., Van Der Knaap, W.P.W. and Rombout, J.H.W.M., (2002): The role of the haematopoietic tissue in haemocyte production and maturation in the black tiger shrimp (Penaeus monodon). Fish & Shellfish Immunology 12, 253–272.
27- Verschuere, L., Rombaut, G., Sorgeloos, P., and Verstraete, W., (2000): Probiotic Bacteria as Biological Control Agents in Aquaculture. Microbiology and Molecular Biology Reviews, December 2000, p. 655-671, Vol. 64, Nu 4.
_||_