فعالیت ضد قارچی باسیلوس سوبتیلیس بومی تهران علیه قارچ فوزاریوم گرامینئاروم
محورهای موضوعی : میکروب شناسی کاربردی
فاطمه رفیعی
1
(گروه میکروبیولوژی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران)
محمد رضا فاضلی
2
(دانشکده داروسازی، دانشگاه تهران، تهران، ایران.)
عباس اخوان سپهی
3
(گروه میکروبیولوژی، واحد تهران شمال، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.)
زهرا نور محمدی
4
(گروه میکروبیولوژی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران)
کلید واژه: باسیلوس سوبتیلیس, فوزاریوم گرامیناروم, مواد ضد قارچی, سورفکتین,
چکیده مقاله :
سابقه و هدف: میکروارگانیسم های خاک نقش مهمی درکنترل بیولوژیک قارچ های بیماری زا دارند. هدف از این تحقیق یافتن باسیلوس سوبتیلیس (B.subtilis) بومی خاک با توانایی تولید لیپوپپتیدهای ضد قارچی می باشد که برای از بین بردن فوزاریوم گرامینارومFusarium graminearum) )، عامل آلودگی گندم، ذرت، سیب زمینی و بسیاری از گیاهان دیگر کارآمد است.مواد و روش ها: باکتری باسیلوس سوبتیلیس از خاک اطراف ریشه گیاهان سالمِ پارک های پنج منطقه ی شمال، جنوب، شرق، غرب و مرکز شهر تهران جداسازی شد و بر اساس خصوصیات مورفولوژیک، آزمون های بیوشیمیایی و تعیین توالی قطعه ی16S rRNA مورد شناسایی قرار گرفت. فعالیت آنتاگونیستی جدایه های به دست آمده علیه قارچ فوزاریوم گرامیناروم به روش چاهک گذاری بررسی و جدایه هایی که مانع رشد قارچ ها بودند و بیشترین هاله ی عدم رشد را نشان دادند، انتخاب شدند. سورفکتین (surfactin) حاصل از باکتری های منتخب با روش متانولی خالص گردید و با استفاده از کروماتوگرافی مایع با فشار بالاhigh performance liquid chromatography) (HPLC))، متابولیت باکتری ها و سورفکتین خالص (شرکت سیگما) مورد مقایسه قرار گرفت.یافته ها: بر اساس نتایج، از بین 60 جدایه منتخب، 27 جدایه فعالیت ضدقارچی داشتند. 6 جدایه با بیشترین میزان هاله ی عدم رشد قارچی برابر با 8-16 میلی متر انتخاب شدند، سورفکتین زرد و شفاف تولیدی آن ها با HPLC تایید گردید. 2 باکتری با بیشترین میزان تولید ، با روش مولکولی قرابت نزدیکی با باسیلوس سوبتیلیس را نشان دادند.نتیجه گیری: نتایج نشان می دهند که باسیلوس سوبتیلیس های جداسازی شده از خاک، گزینه خوبی برای کنترل زیستی قارچ های بیماری زای گیاهی می باشند و بنابراین می توانند جایگزینی مناسب برای قارچ کش های شیمیایی باشند.
Background & Objectives: Soil microorganisms play an important role in the biological control of pathogenic fungi. The aim of this investigation was to isolate soil-borne Bacillus subtilis with the ability to produce antifngal lipopeptides that are suitable for suppressing Fusarium graminearum, which contaminates wheat, corn, potato and a wide range of plants.Materials & Methods: B. subtilis was isolated from the rhizospher of healthy plants of park slocated in the five areas north, south, east, west and center of Tehran and was identified based on morphological characteristics, biochemical tests and sequencing of 16S rRNA. The antagonistic activity of isolated strains against F. graminearum was investigated by Well method. The strains that inhibited the growth of fungi and showed the greatest inhibition zone, were selected. Surfactin of selected bacteria was purified by methanol method and bacterial metabolites and pure surfactin (Sigma Company) were compared with, high performance liquid chromatography (HPLC).Results: Among 60 isolated strains, 27 strains had antifungal activity. Six strains with the highest fungal inhibition zone (8-16 mm) were selected and their yellow color and transparency was a confirmation to HPLC. Two bacteria with the highest amount of surfactin production by molecular method showed high similarity with B. subtilis.Conclusion: The results show that Bacillus subtilis isolated from soil are good candidates for biological control of plant pathogenic fungi and therefore can a suitable alternative to chemical fungicides.
_||_