جداسازی، شناساﻳﻲ و ارزیابی پتانسیل ضد قارچی باکتری های تجزﻳﻪ کننده کیتین جدا شده از خاک ریزوسفر گیاهان

محورهای موضوعی : میکروب شناسی محیطی

طاهره صلاحی نژاد ¹ (کارشناس ارشد، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تنکابن، دانشکده علوم پایه، گروه میکروب شناسی)
زهیر حشمتی پور ² (دانشیار، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تنکابن، دانشکده علوم پایه، گروه میکروب شناسی)
مسعود هاشمی کروئی ³ (دانشیار، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تنکابن، دانشکده علوم پایه، گروه میکروب شناسی)

تاریخ دریافت : 1392/04/12 تاریخ پذیرش : 1392/07/18 تاریخ انتشار : 1393/01/12

کلید واژه: 16S rRNA, کیتیناز, پتانسیل ضد قارچی, فوزاریوم سولانی,

چکیده مقاله :

سابقه و هدف: ﻛﻴﺘﻴﻨﺎز ﻳﻜﻲ از مهم ترﻳﻦ آنزﻳﻢهای صنعتی می باشد که در سال های اخیر به دلیل کاربرد وسیع، به ویژه در کنترل زیستی قارچ های بیماری زا مورد توجه بسیاری قرار گرفته است. این مطالعه با هدف جداسازی و شناساﻳﻲ باکتری های تجزیه کننده کیتین از خاک ریزوسفر گیاهان و نیز بررسی میزان پتانسیل ضد قارچی آنها انجام شد. مواد و روش ها: در این پژوهش 38 نمونه خاک از ریزوسفر بوته های چای، شعمدانی و شبدر به صورت تصادفی جمع آوری گردید. پس از تعیین رقت و کشت نمونه ها بر روی محیط کیتین کلوئیدال آگار (CCA)، جدایه های دارای هاله شفاف انتخاب شدند. سنجش آنزیم کیتیناز با دستگاه اسپکتروفتومتر انجام شد. پتانسیل ضد قارچی باکتری های جداسازی شده علیه قارچ فوزاریوم سولانی مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت، تعیین هویت مولکولی سویه ها با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز و تعیین توالی ناحیه 16S rRNA انجام شد. یافته ها: در این مطالعه تنها یک سویه جدید به نام سراشیا سویه صلاحی با فعالیت تجزیه کنندگی کیتین جداسازی گردید. بیشترین میزان فعالیت آنزیمی این سویه در دمای 30 درجه سانتی گراد و پس از 4 روز معادل U/ml 4.37 بود. همچنین فعالیت ضد قارچی این باکتری با هاله عدم رشد 1.5 سانتی متر به اثبات رسید. نتیجه گیری: نتایج این پژوهش نشان داد که این سویه جدید پتانسیل کاربرد به عنوان یک آفت کش طبیعی محصولات زراعی، جایگزین آفت کش های سنتزی و سرطان زا را دارد.

چکیده انگلیسی:

Background and Objectives: Chitinase is one of the most important industrial enzymes, which is recently employed especially in the biological control of pathogenic fungi. This study was aimed to isolate and to identify the chitin degrading bacteria obtained from the rhizosphere soil and also to evaluate their antifungal ability. Materials and Methods: In this study, 38 soil samples from the rhizosphere of tea plants, Geranium and clover were collected randomly. After serial dilution and growth of the samples on colloidal chitin agar (CCA), the isolates with a clear zone were chosen for further studies. The presence of Chitinase enzyme was measured by a spectrophotometer. Next, we determined the antifungal activity of the isolates against Fusarium solani. Finally, the isolates were identified based on polymerase chain reaction and sequencing 16S rRNA genes. Results: In this study, only one new strain referred to as Serratia Salahi strains was isolated which showed the chitin degrading activity. The highest enzymatic activity (4.37 U/ml) of this strain was obtained at 30°C after 4 days. Furthermore, the antifungal activity of this bacterium could create 1.5 cm inhibition zone. Conclusion: According to the findings, this new strain can be used as a natural pesticide and therefore, it is possible to replace the synthetic pesticides with this natural compounds.