جداسازی سویه‌های بومی باکتری Bacillus thuringiensis از خاک برخی از مهمترین مناطق استان فارس و ارزیابی اثر کشندگی آنها بر روی لارو حشره شب‌پره هندی
محورهای موضوعی : حشره شناسی و سایر بندپایانفاطمه توانگرزمین 1 , شهرام حسامی 2 , الهام معظمیان 3 , غلامرضا صالحی جوزانی 4
1 - دانشجوی دکتری، گروه گیاه‌پزشکی، واحد شیراز، دانشگاه آزاد اسلامی، شیراز، ایران
2 - گروه گیاه پزشکی، واحد شیراز، دانشگاه آزاد اسلامی، شیراز
3 - استادیار، گروه میکروبیولوژی، واحد شیراز، دانشگاه آزاد اسلامی، شیراز، ایران
4 - استاد، گروه پژوهشی بیوتکنولوژی میکروبی، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی، کرج، ایران
کلید واژه: Bacillus thuringiensis, واژه‌های کلیدی: حشره‌کش بیولوژیک, ژن Cry, جدایه بومی, Keywords: Biological insecticide, Cry gene, Native isolate,
چکیده مقاله :
باکتریBacillu thuringiensis (Bt) پروتئین هایی بلوری تولید می کند که برای گونه های مختلف حشرات سمی می باشد. در این مطالعه سویه های Btاز خاک های برخی از نواحی استان فارس جداسازی و اثر کشندگی آنها روی حشره شب‌پره‌هندی (Plodia interpunctella Hubner) مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور، 110 جدایه باکتری از خاک مناطق شیراز، مرودشت، فسا و سروستان جداسازی شد. شناسایی اولیه جدایه ها بر اساس رنگ آمیزی گرم و بررسی بلور پروتئینی با استفاده از میکروسکوپ فازکنتراست صورت گرفت. جدایه ها از نظر شکل بلور پروتئینی کروی و لوزی بودند. بررسی مولکولی به روش PCR نشان داد که از 110 جدایه جمع آوری شده، 40 جدایهحاوی ژن Cry1 بودند. بررسی کشندگی آنها روی لارو سن سوم حشره شب پره هندی مطالعه گردید. بر طبق نتایج این پژوهش، غلظت sporeml-1 108×2 بعد از گذشت 72 ساعت، به عنوان مؤثرترین تیمار در نظر گرفته شد و سه جدایه sh20،g44 و FA-16 به ترتیب با درصد تلفات 33/53، 80 و 33/73 بالاترین میزان مرگ و میر را روی لارو های سن سوم حشره شب‌پره‌هندی ایجاد نمودند. جدایه های g46-29، g45-5، TA22، 35b و E8 روی لارو سن سوم حشره شب‌پره‌هندی بی‌تاثیر بودند. امید است که بتوان با معرفی این جدایه های بومی باکتری Bt، گامی مهم در راستای تولید داخلی سموم بیولوژیک برداشت.
Bacillu thuringiensis (Bt) produces crystalline proteins that are toxic to various insect species. In this study, Bt strains were isolated from the soils of some areas of Fars province and their toxicity on larva of Plodia interpunctella (Hubner) was investigated. For this purpose, 110 strains were isolated from the soils of Shiraz, Marvdasht, Fasa and Sarvestan. Initial identification of the isolates was carried out on the basis of Gram staining and morphological characteristics of protein crystals using phase-contrast microscopy. The protein crystals of the isolates were spherical and rhombic. Molecular analysis by PCR showed that 40 isolates of the collection were contained Cry1 gene.The isolatestoxicity was studied on third instar larvae of P. interpunctella. According to the results of this study, 2×108 sporeml-1 concentration after 72 hours was considered as the most effective treatment and the three isolates sh20, g44 and FA-16 had the highest mortality (53.33%, 80% and 73.33%, respectively) onlarva of Indian meal moth. Isolates g46-29, g45-5, TA22, 35b, and E8 were ineffective on the third instar larvae of Indian meal moth. In general, the bioassay results showed that the strains isolated from the soils of the study area had considerable toxic effect on Indian meal moth larvae. We hope that introducing these native isolates of Bt will be an important step to produce domestic biological pesticides.
_||_